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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | CCC-HHM-2 |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-0954 |
| 中文名称: | 人胚心肌组织来源细胞 |
| 细胞数量: | 1*10^6 |
| 组织来源: | 心肌 |
| 细胞种属: | 人 |
| 生长特性: | 贴壁 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养基: | H-DMEM,90%;FBS,10%;双抗。 |
| 传代方法: | 1:2-1:4 |
| 培养条件: | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存: | Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%(for reference)Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |






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文献和实验足细胞来源: 丁香园网友yulinlong的观点为: 很多细胞中心就有卖的,或者有的公司可以代理ATCC公司的就可以。 有的文献用的永生化细胞系是他们自己建的系或者别人建系赠予的,你也可以考虑向国内或者国外去请求馈赠。有的会给的。 丁香园网友wenyueqiang的观点为: 美国爱因斯坦大学的PETER MUNDEL有 足细胞
鉴定和GVHR征象追踪等。脐血库为接受移植的患者提供脐血来源的方便,是一项很有发展潜力的临床移植项目。近年来正在进行的研究还发现,应用不同的细胞因子,体外诱导来自骨髓、脐血以及胚胎多能干细胞的定向分化,以获得具有不同功能和分化方向的干细胞,若用之于移植,有可能使临床治疗更具组织或器官特异性。
7. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 取水囊引产的妊娠3—6个月的胎儿。用75%乙醇消毒胸壁。剖胸取出两肺。剪去肺内较大的支气管后,将肺边缘组织置于平皿中,用PBS液清洗3次,除去血液。选择苍白色的肺组织,剪成1mm3 左右的碎块。再用PBS液洗2—3次,直至液体澄清为止; 2. 将肺组织块移入三角瓶中,加入5—6倍量的0.25%胰蛋白酶,密封瓶口。置4℃冰箱内消化20h; 3. 吸弃上层液体。往三角瓶中加入少量培养液,用吸管反复吹打分散细胞。稍静置,待残存的组织块下沉
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