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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | GL261 |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-1211 |
| 中文名称: | 小鼠胶质瘤细胞 |
| 规格: | T25 |
| 组织来源: | 胶质瘤;C57BL/6 |
| 形态特征: | 上皮样 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | DMEM/F12+10%FBS |
| 传代方法: | 1:2传代 |
| 冻存条件: | 无血清细胞冻存液 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |






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文献和实验小鼠脑神经瘤细胞概述及培养方法! 一、细胞介绍 克隆 Neuro-2A 是由 R.J.Klebe 和 F.H.Ruddle 经 A 株白鼠的自生肿瘤建立。该细胞产生大量微管蛋白,此蛋白在神经细胞中起应答轴浆流动的收缩系统作用。 二、基本信息 平台编号:bio-73109
一、材料:125I-UdR购自中科院北京原子能所,放化纯度>95%。脱氧腺苷(AdR)、脱氧鸟苷(GdR)、脱氧胞苷(CdR)、脱氧尿苷(UdR)均为Sigma公司产品。 二、方法 1、细胞培养:当癌细胞贴壁生长超过瓶壁的70%,用胰蛋白酶消化30-40s,传代培养。肿瘤细胞每3-4d传代1次。在50ml培养瓶中,细胞数达2×106个细胞后,取处于对数生长期的细胞进行细胞存活实验。 2、细胞存活实验:将制备好的细胞按1×105个/ml细胞接种于25ml的培养瓶中
实验步骤 1. 小鼠用pH值7.4,0.1M PBS彻底穿心灌注。 2. 用剪刀去头。 3. 剥开头骨的软组织。 4. 除去下颌骨。 5. 除去头骨延髓到上颌骨之间的组织。 6. 手术剪刀,取出头骨顶部,顺时针方向切割,开始和结束于右后鼓膜钩。 7. 舀出大脑,维持组织的完整性。 8. 立即将脑组织置于预冷的流式细胞术缓冲液中(1%BSA 1mM的EDTA的 pH值7.4 0.1M PBS,50
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