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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
非洲绿猴肾细胞
- 库存:
大量
- 供应商:
南京赛泓瑞
- 肿瘤类型:
/
- 细胞类型:
贴壁/悬浮
- 品系:
人/大小鼠
- 组织来源:
引种
- 相关疾病:
癌症/正常组织
- 物种来源:
ATCC、DSMZ、ECACC、中科院等
- 免疫类型:
人/大小鼠
- 细胞形态:
详细见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 器官来源:
引种
- 运输方式:
常温或者干冰
- 年限:
8年
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | VEROC1008(E6) |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-2049 |
| 中文名称: | 非洲绿猴肾细胞 |
| 规格: | T25 |
| 形态特征: | 上皮细胞样 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 特征特性: | VEROC1008是VERO76的克隆细胞株,而VERO76是初始VERO细胞株的一个衍生株。 |
| 培养条件: | DMEM(高糖)+10%FBS |
| 传代方法: | 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 |
| 冻存条件: | 无血清细胞冻存液 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
南京赛泓瑞生物科技有限公司专注于是一家专注于研发和生产原代细胞、肿瘤细胞及细胞培养相关试剂产品的生物高科技企业,可以为各类研究机构提供符合标准规范的原代细胞、肿瘤细胞及相关实验技术服务;
南京赛泓瑞生物科技有限公司有一支由南京大学和南京医科大学多名博士组成的研发团队,致力于为您的细胞研究及细胞培养实验提供高品质、稳定性良好的产品,做“您身边的细胞培养专家”。细胞培养提供全程服务,产品涵盖原代细胞、细胞系、免疫细胞及干细胞、胎牛血清、无血清非程序冻存液、完全培养基、基础培养基、“支原体”/“黑胶虫”清除试剂、细胞因子、胰酶、双抗等细胞培养及实验相关产品。
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文献和实验传代步骤比较传统:倒掉培养液->PBS洗2遍->胰酶0.25%消化->倒掉胰酶->加培养基->用吸管吹打均匀->分瓶->放置37度,5%CO2孵箱。我的体会是:1、消化时间和实验环境温度也有很大关系,我们实验室条件比较差,不能维持恒温(不过我想大部分实验室目前也还是做不到的)。夏天的时候,消化特别快。但是到了冬天,就很慢,要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以,经验很重要,如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断,首先效率太低,而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶,当感觉到有些泛白,瓶角有少许细胞
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雀形目的 1科。体长约 200毫米;跗蹠短弱,大多被以靴状鳞;体羽柔长而疏松,颈项具纤羽如发。世界有 15属 125种,分布于亚洲南部、东南亚、非洲等热带地区。中国有 4属 20种。多数营群栖生活,活动于灌丛或树枝间。在灌丛枝间营巢。巢呈杯状,以细枝、苔藓、枯草茎根等构成。每窝产卵 2~ 5枚。夏季育雏期间捕食大量昆虫。平时以种子、浆果等为食,兼吃昆虫。多数善鸣,可作笼鸟观赏。 中国常见的种类有:白头鹎,头部黑色、枕部羽白色,俗称“白头翁”;白喉冠鹎,头枕
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