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100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | S2 |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-2234 |
| 中文名称: | 果蝇细胞 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | Schneider's Insect Medium +10%FBS |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |






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文献和实验果蝇细胞的培养实验方法(Culturing Drosophila cells)
注:感谢哈佛大学医学院果蝇RNAi筛选中心的支持和提供本实验方法 I. MEDIUM A. S2, S2C, S2*, S2R+, S3, l(2)mbn, Kc(167), & DL2 cells: Schneider's/ 10% FBS/ PS 450 ml Schneider's medium (Gibco #11720-034) (pour off 50 ml into Falcon to save as serum-free
Nature:哈佛大学董民团队利用昆虫细胞全基因组 CRISPR 筛选,揭示杀虫毒素受体
luminescens) 中分离到活性蛋白毒素(Tc Toxin)。 为了更好的利用开发昆虫病原线虫这一重要的生物防治资源,人们一直对 Tc 毒素相关的分子机制的研究很感兴趣,并陆续在不同菌属细菌里发现了上千个 Tc 毒素家族成员,但却对其昆虫宿主因子知之甚少。 董民实验室发现 Tc toxin 家族的代表毒素(pTc)对多种人源细胞系毒性较低,而对果蝇 S2R+ 细胞毒性较高,5 pM 的毒素可以让 50% 的果蝇细胞呈现毒理表型,这暗示了果蝇 S2R+ 细胞表面很可能存在对 Tc 毒素高特异的受体
背景知识 普通果蝇( Drosophila melanogasler ,2n =8)属昆虫纲双翅目昆虫。具有生活史短、繁殖率高、染色体数少、饲养简便、突变性状多达400个以上等优点,是遗传学研究的良好材料,除此基因分离、连锁交换应用、另外在染色体畸变以及基因的表达与调节等方面,对果蝇也作了广泛而深入的研究。 美国《科学》杂志2000年3月24日报道:果蝇基因组的测序工作已经结束,并确定了果蝇细胞
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