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- 库存:
100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | CTX TN2 |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-2611 |
| 中文名称: | 大鼠星型胶质细胞 |
| 种属来源: | 大鼠 |
| 组织来源: | 脑 |
| 生长特性: | 贴壁 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |






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文献和实验新生1-2天Wistar大鼠乳鼠,经75%酒精消毒,断头处死,取脑放入冷的D-Hanks平衡盐溶液,去除脑膜及大血管。 分离两侧大脑皮质并剪成1mm 3 大小,加入0.25%胰蛋白酶37℃空气浴震荡消化10 min,用含10% FBS的DMEM培养基终止消化,离心1000rpm 10min,去上清,再用含10% FBS的DMEM培养基重悬沉淀. 经75µm筛网过滤,收集滤液,离心1000rpm 10min,收集沉淀用含10% FBS的DMEM培养基重悬,调整细胞密度至1.5×106/ml
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 大鼠胶质细胞酸性蛋白 (GFAP)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗大鼠 GFAP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 GFAP 与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠 GFAP ,形成免疫复合物连接在板上
后,转移细胞悬液至新瓶中,加入DMEM/F12完全培养基,在37ºC, 5%CO2培养箱中培养9天(每3天更换培养液一次),第9天将培养瓶置于恒温旋转摇床上37ºC, 240rpm,摇18小时,去掉悬浮的细胞,用D-Hanks液清洗3次,进行传代培养即得纯化的星形胶质细胞。经免疫细胞化学法检测,98%以上的细胞GFAP免疫反应为阳性。
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