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- SHBio
- 进口
- SHC3098
- 2025年07月07日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
小鼠脑神经瘤细胞Luciferase荧光稳转株
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | Neuro-2a/Luc |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-3234 |
| 中文名称： | 小鼠脑神经瘤细胞Luciferase荧光稳转株 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | DMEM/High+10%FBS |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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文献和实验小鼠脑神经瘤细胞概述及培养方法！ 一、细胞介绍 克隆 Neuro-2A 是由 R.J.Klebe 和 F.H.Ruddle 经 A 株白鼠的自生肿瘤建立。该细胞产生大量微管蛋白，此蛋白在神经细胞中起应答轴浆流动的收缩系统作用。 二、基本信息 平台编号：bio-73109
想长期追踪细胞、做药筛、看蛋白定位，都绕不开报告基因细胞株： GFP、Luciferase 这类报告基因稳定细胞株怎么构建？融合表达和分开表达怎么选？筛选时用抗生素还是流式？ 先说结论： 报告基因稳转株的构建框架与普通稳转株一致（载体设计 → 慢病毒感染 → 筛选 → 验证 → 冻存），核心差别在两点：一是报告基因的"表达形式"（融合标签 vs 独立表达）决定载体设计；二是报告基因自带可检测信号，可以直接用流式分选替代或辅助抗生素筛选，把荧光/发光均一性作为重要的验证指标。 方案确认顺序
表达目的基因（或 Luciferase 等报告基因）的细胞接种到动物体内，瞬转细胞撑不过整个实验周期。 建立疾病或工具细胞模型。 例如耐药株、高转移株、稳定表达 Cas9 的工具细胞株等，本质都是稳转株。 投稿要求。 越来越多期刊要求功能实验基于稳定细胞株，而不是一次性的瞬时转染结果。 --- 四、稳定细胞株是怎么"稳定"下来的？ 目前主流的构建方式是慢病毒介导： 载体设计：目的基因（或 shRNA、sgRNA）克隆到带抗性基因（如 puromycin 抗性）和/或荧光报告基因的慢病毒载体上； 病毒
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