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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
TU212细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | TU212 |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-0960 |
| 中文名称: | 人喉癌细胞 |
| 规格: | T25 |
| 组织来源: | 咽喉 |
| 形态特征: | 上皮样 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | 1640+10%FBS |
| 传代方法: | 1:2传代 |
| 冻存条件: | 无血清细胞冻存液 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |








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文献和实验,这些 CarT 大佬们都用!不准?不准的话 FDA 能认吗? 复杂又昂贵的方法,为了准,咱们忍啦! 标准品检定绘制标准曲线,精确定量病毒基因组 DNA 拷贝数。 测定插入细胞基因组的 5'LTR—3'LTR 病毒基因组拷贝数。 工具细胞 293T 基因组中的病毒特征单拷贝基因 A 和宿主特征单拷贝基因 B。 TU=N * C / V =(初始细胞 / 感染病毒体积) × (2 × A 基因拷贝 / B 基因拷贝),计算感染效率。 不要反转录,不要受 RNA 降解或反转录效率影响。 如果病毒有荧光或者抗性
chenguooo 各位大侠,小弟马上要做慢病毒尾静脉注射,想转染肝脏血管内皮细胞,想知道一只BALB/C小鼠要注射多少量?转染效率有多少?查不到类似的文献参考 体内肝脏血管内皮好转吗?我的慢病毒滴度是5*108TU/ML,来自上海英为信公司。 谢谢! zhujoker 慢病毒滴度是5*108TU/ML 打活体滴度太低,效果可能不会好 chenguooo
hetingcopy 大家好,我现在正在做慢病毒包装,用的是CLONTECK的包装系统,第一次感染293T细胞后,荧光很亮,48H后收集病毒上清,离心后冻于-80度,一天后感染靶细胞,什么都没有?请问大家是怎末做的?谢谢。 大鹏鸟 看到荧光并不代表包装成功,它代表的只是你的质粒转进去了。做慢病毒包装时必须要搭配好几个质粒的比例。转染之后要能看到细胞形态的病变。收集上清的时候要注意尽快分装保存。有可能的话最好把细胞也裂解一下
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