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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
PC12-LUC细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | PC12-LUC |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-2775 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |








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文献和实验丁香园Ginkgokeer的问题:未分化的PC12在什么情况下会使它产生分化,从而成为分化的PC12??是不是NGF有这样的作用?除此以外呢?丁香园sudajyou的观点:pc12 在未分化时贴壁生长,但最好用5%HS, 5%FBS/DMEM培养液,据说PC12在完全没有HS的培养液中贴壁不好。我用的是CORNING的培养皿,PC12贴壁很好。丁香园忘记宝儿兔兔的问题:关于pc12细胞即鼠嗜铬细胞瘤细胞,它是属于神经细胞吗?分化的和未分化的各有什么用途?培养时候大约需要多少天?丁香
PC12传代的消化丁香园wangpengljr的问题:我最近养PC12细胞做分化方面的研究,但是遇到的难题是PC12细胞本身的贴壁能力就差(养PC12细胞最好是用Gibco的马血清,Hyclone的不贴壁!),最开始没有用胰酶处理,直接吹打下细胞发现成团现象,用0.02%EDTA的PBS吹打似乎不易成团,但是慢慢地细胞贴壁能力下降了,我用poly-Lys包被都不行。我之所以不用胰酶是因为怕胰酶的处理会影响我以后的NGF诱导分化的实验,难道非得要我用胰酶吗??那么该用多大浓度合适呢?丁香
丁香园ivy_mayan的问题:在做PC12的H2O2损伤模型时,由于细胞经过H2O2的冲击,大多活性不好了,所以贴壁性变差,结果在测MTT时由于要去掉上清液,细胞会被一同吸走,这样所测吸光值就不准了,请问大家,怎么可以使PC12贴壁更牢(即使经过损伤冲击)?丁香园george的观点:1.细胞培养板的选择:一定要用进口的培养板,国产的大多贴不好。2.尽量使细胞处于良好的状态,包括培养液要新鲜配制备,注意PH值,提高牛血清的浓度。丁香园midas的观点:1.用PLL或鼠尾胶包被扳子!2.H2
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