- ￥8800
- 西格
- XG-X6946
- 国产
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 物种来源：
人
- 库存：
21
- 英文名：
NCI-H2291；NCIH2291
- 供应商：
上海西格
- 规格：
1×106
细胞培养操作
1) NCI-H2291细胞复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。
9. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
使用者不得将本库细胞系(株)转让给第三者。使用者在发表研究论文或结果时，应注明细胞系(株)的来源。
公司正在出售的产品：
| 胱硫醚β合酶(CbS)重组蛋白 | 小鼠主动脉外膜成纤维细胞 |
| 微丝相关蛋白hHBrk1抗体 | 大鼠小胶质细胞HAPI（种属鉴定） |
| 乙酰辅酶A微量法检测试剂盒 | 大鼠血管平滑肌细胞 |
| TIMP-3 基质金属蛋白酶抑制因子3ELISA检测试剂盒 | 小鼠淋巴瘤细胞，YAC-1细胞 |
| 腺苷激酶(ADK)ELISA试剂盒 | 小鼠纤维肉瘤细胞；WEHI-13VAR |
| 人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA检测试剂盒 | 马铁菊头蝠肺细胞；BL3 |
| Escherichia coli | 小鼠杂交瘤细胞株；GP73-5B4-G6-C9-C6-G4 |
| 碱性亮氨拉链转录因子ATF样蛋白检测试剂盒 BATF ELISA Kit | 杂交瘤细胞株；F112 |
| 磷化结节性硬化蛋白封闭多肽 | 小鼠股动脉内皮细胞 |
| WBP2单克隆抗体 | DMEM/F12完全培养基： |
| CD4抗体 | 小鼠骨髓杂交瘤细胞株；10H4 |
| ZDBF2蛋白抗体 | 人肝癌细胞；Hep 3B2.1-7 |
| 5-PeS1(2-D8) | NCI-H2291细胞 大鼠冠状动脉平滑肌细胞 |
| 小鼠抗人kappa杂交瘤细胞；mAbhIgκ-488 | 大鼠腹水癌细胞；Walker/LLC-WRC256 |
| 兔骨骼肌细胞 | 人高转移性乳腺癌细胞 |
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文献和实验都是贴壁细胞，在消化传代过程中，步骤如下：倒尽旧的培养液－＞用无血清的培养基清洗一两次－＞加入一定量的胰酶，置于37度培养箱中5--10分钟，使细胞悬浮－＞显微镜下观察，待细胞大部分变圆时，回到超静台－＞加入一定量的含血清的新培养液，以终止胰酶作用－＞反复吹打细胞－＞再置显微镜下观察，直到细胞全部悬浮起来－＞吸出一部分加入新的培养瓶中－＞最后再补充加入一定量新的培养液。注意： 1、吹细胞时尽量多吹边角儿，此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀，可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM
方法1、培养液中按1%的体积加双抗（含青霉素1万U/ml，链霉素0.01g/ml）及肝素液（含肝素100U/ml）。用3.5%NaHCO3液调pH值为7.2~7.4，然后加灭活的小牛血清，使浓度为20%。再加PHA（50U~75U/ml），无菌分装于培养瓶内，每瓶1ml。2、无菌操作采血，并以肝素抗凝，同时进行白细胞计数及分类计数。3、取0.1ml抗凝血，加入到含1ml培养液的培养瓶中，每个血样接2~3个培养瓶。如果以血浆或分离的淋巴细胞代替全血，加入培养瓶中更好。4、37℃培养72h，在培养结束前16h
一、实验材料NCI-H1299，购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家（货号）细胞培养瓶FALCON 中国（353014）Penicillin/streptomycin solution（KGY002）0.25% Tripsin-EDTA（BK-E3076）PBS（BK330-2）胎牛血清GIBCO 美国（10270-106）1640 培养基Hyclone 美国（SH3080901）Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
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