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- 2025年07月16日
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10×Proteinase K
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上海莼试
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0.2ml|1ml
英文名称：10×Proteinase K
产品规格：0.2ml|1ml
发货周期：1～3天
Proteinase K，中文名为蛋白酶K。不含DNase，不含RNase，进口分装，可直接使用。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验，例如基因组DNA 抽提、酶的消化去除等。
酶活力>30U/mg。在37℃，以血红蛋白为底物，1 分钟内可以产生相当于1 微摩尔酪氨酸Folin 阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶K 的量，定义为一个单位蛋白酶K 酶活力。
在很宽的pH 范围内有效，有效的pH 范围为pH4.0-12.5，最佳pH 范围为pH7.5-8.0。
蛋白酶K 的最佳反应温度为65℃，但在65℃或更高的温度蛋白酶K 自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55℃。
在0.2-1%SDS 或约10mM 尿素存在的情况下，蛋白酶K 显示更高的酶活性。蛋白酶K 的常用工作浓度为0.05-1mg/ml，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH 是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。
常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween-20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K 的活力影响不大。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
注意事项：
100×蛋白酶K 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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文献和实验与 TritonX100 等细胞通透剂。 2. 蛋白酶K一般工作液浓度为 20 μg/ml,亦可自行将浓缩液配制1-10 mg/ml。蛋白酶K可用 PBS 配制，也可用蛋白酶K缓冲液(100 mM Tris HCl pH8.0, 50 mM EDTA)，分装后-20ºC保存。 3. 蛋白酶K反应时间一般为10-30 min，具体时间长短与切片厚薄有关，4 μm左右的片子可以通透 10 min，如切片厚度30 μm左右的可延长至30 min，需实验摸索最佳时间。通透时间过长易脱片、过短起不到通透效果。 四
链，迅置于冰上冷却。然后置于37℃～42℃杂交过夜。（2）RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景，因此，在操作步骤中省略此步。 （一）地高辛-碱性磷酸酶（Dig -AKP）标记DNA探针在石蜡包埋切片检测病毒DNA中的应用 1．组织前处理 （1）固定：组织以10%中性福尔马林液或Bouins液固定，常规石蜡包埋，切片厚4～6μm，粘附于涂有粘附剂的玻片上，入烤箱60～80℃6～8h，使切片更紧贴玻片。 （2）脱蜡：二甲苯10min ×2，自100%乙醇，90
好的输液瓶中，贴上标签，4℃保存备用。 6．蛋白酶K（降解蛋白质）：20mg/mL 无菌三蒸水溶解。 7．RNA酶 （降解RNA） 配制方法：将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L的Tris?CL（PH7.5）、15mmol/LNaCL中，配成10mg/ml的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份存于?20℃。 8．氯仿：异戊醇=24：1 100ml 按24:1的比例加入氯仿、异戊醇，摇匀，转到准备好的瓶中，贴上标签，4℃保存备用。 9．TE缓冲液（溶解DNA） PH
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