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- 详细信息
- 文献和实验
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35
- 英文名:
Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Mouse (DyLight 488)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
4℃保存应避免冷冻
- 规格:
2ml|4ml|10ml
英文名称:Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Mouse (DyLight 488)
产品规格:2ml|4ml|10ml
发货周期:1~3天
本试剂盒采用SABC系统,是专为免疫化学而设计的,用以显示组织或细胞中的抗原分布。DyLight是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料,由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度,更高的光学耐受性(抗淬灭性)和特异性,对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势,标记的抗体比Cy2和FITC标记的更亮,但背景更低;DyLight 488-SABC,将链霉亲和素—生物素引入荧光系统,能进一步提高敏感性及降低背景。DyLight 488最大吸收峰 493nm;最大发射峰518nm。呈黄绿色。
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 切片脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭:滴加稀释的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10),室温 20 分钟。甩干,勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗(小鼠 IgM),37℃孵育 1~2 小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5. 滴加稀释的生物素标记羊抗小鼠 IgM(参考效价1:100),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6. 滴加稀释的 SABC- DyLight 488(参考效价 1:200-800),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4 次。
7. 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
注意事项:
免疫荧光试剂盒(小鼠源IgM型一抗)(DyLight488) 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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