- ￥400
- ＣＴＢ
- ＤＣ10100
- 美国
- 2025年07月14日
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4°C
- 保质期：
1年
- 库存：
大量
- 供应商：
上海点创生物科技有限公司
- 规格：
１００ＭＬ/５００ＭＬ
| 规格： | 产品价格： | ￥400 | |
|---|---|---|---|
| 规格： | １００ＭＬ | 产品价格： | ￥４００ |
| 规格： | ５００ＭＬ | 产品价格： | ￥１２００ |
Enhanced Chemiluminescent Kit User Manual
【重要信息】
一抗工作浓度：0.2—1.0 ug/ml；二抗工作浓度：10—50 ng/ml
使用比例：Solution I : Solution II = 1:1；10 cm2 转印膜使用1—2 ml工作液
【产品说明】
本产品是超敏型化学发光试剂盒，用于检测辣根过氧化物酶（HRP）标记的目标条带，检测灵敏度达到pg级。试剂盒由溶液I和溶液II组成，使用前等体积吸取，混合均匀即可对转印膜进行显色。由于优化了底物组成，使用了新型高效Enhancer，发光强度比传统ECL显色液提高了30倍，并有效地降低了背景。试剂盒使用新的氧化剂代替不稳定的双氧水，提高了kit稳定性，4℃可稳定放置1年。工作液被HRP催化后，发出特定波长荧光，可对X光胶片曝光，也可直接使用荧光CCD 扫描。
【操作步骤】
- 根据常规操作转印结束后，进行封闭、一抗孵育、二抗孵育以及必要的洗膜步骤，根据膜的大小，按每10cm2膜使用1-2ml工作液，按比例吸取等体积溶液I和溶液II混匀，配制成发光检测工作液。
- 用平头镊子将膜取出，膜的下缘轻轻接触吸水纸，去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上，置于洁净保鲜膜上。用移液器将工作液加到转印膜上，使其均匀覆盖，室温孵育1-2分钟。
- 用平头镊夹起转印膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，去除膜上多余的液体，留下少量工作液，不要让膜完全干燥。膜的蛋白面朝上，包裹于洁净保鲜膜内。轻轻赶出其间的气泡，用小块透明胶带粘住四角，固定在X光片暗盒内。
- 在暗室中取一张X光胶片置于包裹的膜上，合上暗盒，曝光30秒至1分钟。立即显影定影，根据其曝光强度，缩短或延长下一张X光胶片的曝光时间。如果背景过高，可以使用两张X光胶片同时压片。
- 如果需要使用CCD拍照，可以将膜放置于工作液中，开机后再按照使用说明，将转印膜取出，进行拍照。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验Ecl 显色原理：鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。 试验步骤： 1）将两种显色底物1：1等体积混合（一般各1ml/membrane）。 2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。 3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。 4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1min。 5）显影、定影。 6）根据结果调整曝光时间和曝光区域，得到
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）-底物化学发光 ECL 法
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与 Southern 或 Northern 杂交
方法也不同，常用的检测系统有化学发光检测（ECL）和化学显色 DAB 检测系统。 化学发光检测（ECL）： 利用 HRP 催化化学发光物质，生成一种不稳定的中间物质，其衰变时在暗室内形成明显的肉眼可见的化学发光带，利用 X 胶片感光 原理，将结果记录下来。 ECL 显色试剂配制：化学发光底物 A 和 B 按照 1：1 比例等体积混匀。 将混合好的显色底物覆盖印迹膜 1-5 min，黑暗条件下观察荧光效果。 在暗室可用放射自显影胶片或化学发光成像系统记录结果 。 如采用放射自显影胶片，曝光几秒
