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- 英文名:
DNase I, Grade II
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2-8°C
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100mg
DNase I
grade II, from bovine pancreas
别名:
脱氧核糖核酸酶, 脱氧核苷酸酶 5′-寡核苷酸脱氢酶
一般描述
牛胰腺脱氧核糖核酸酶I(DNase I)是DNA小沟相互作用的核酸酶,特异性相对较低。该蛋白质由两个中心β 折叠构成,而每个折叠由六个β-链所组成。该结构被大量的环以及α-螺旋区域包围。该酶与核酸外切酶III具有结构相似性。DNase I是研究得最透彻的哺乳动物来源的内切酶之一。它是一种双链特异性内切核酸酶,需要二价阳离子激发最大活性。应用
蛋白质(如膜蛋白)的分离操作。牛胰腺脱氧核糖核酸酶I(DNase I)已被用于:
- 分离肺、皮肤和肿瘤样品中的细胞
- 从抗DNase I的活细菌细胞中提取细菌DNA †
单位定义
一个单位表示在测定条件下导致吸光度以0.001每分钟的速率而增加的酶活力。制备说明
激活剂:Ca2+ (0.12 mM)与Mg2+结合在一起可增强活性 [Laskowski (1971); Melgar及Goldthwait (1968)].
工作浓度:1 mg/ml
在溶解过程中请勿涡旋!
储备条件 (工作溶液):当在水中重悬时,溶液可在2至8 °C下保存2至3天。在溶解过程中请勿涡旋。注:至少以1 mg/ml溶解。
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文献和实验,000 x G for 1 minute 2) For each HiBind® RNA Minicolumn, prepare the DNase I digestion reaction mix as follows: OBI DNase I Digestion Buffer 73.5ul RNase-free DNase I (20 Kunitz unites/ul) 1.5ul Total volume 75ul
assay) 0.5μl H2O 3)DNAse mix: made up near end of binding incubations. DNAse l(Worthington DPFF,Cat#LS0006330, lot #58A047,5mg) is 1mg/ml in150mM NaCl, 50% glycerol, store at ©20℃. Try 3 different [s] ofDNAse mix (A,B,C) 1,2 & 3μl stock DNAse1
DNase I 足迹试验 蛋白质 结合在DNA片段上,能保护结合部位不被DNase破坏,DNA分子经酶切作用后遗留下该片段(亦称“足迹”),进而可以确定它的序列。在电泳凝胶的放射性自显影图片上,相应于蛋白质结合的部位没有放射性标记条带。 DNase I足迹试验是一种鉴别RNA聚合酶等蛋白质在DNA上结合位点的方法,它不仅能找到与特异性DNA结合的目标蛋白,而且能告知目标蛋白结合在哪些碱基部位。足迹试验的方法较多,常用
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