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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温,避光
- 保质期:
6个月
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震
所需设备:所需设备:721、722型可分光光度计、酶标仪、96孔酶标板。工作波长550 nm。
OPTI-MEM产品优点:
1、线性范围:0-500U/L(判定依据:r2≥0.995);
2、准确度:不准确度≤10%;
3、精密度:批内CV<4.0%;批间相对极差<6.0%;
4、灵敏度:试剂检测下限≤4.0U/L。
OPTI-MEM样品收集、处理及保存
细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
OPTI-MEM相关产品如下:
hzM119257 2-甲氧基异烟酸, 98%
hzM119392 3--4-氨基, 98%
hzM119964 4-甲氧基-N-氧化物, 98%
hzM119976 2-甲氧基-4-氨基, 99%
hzM120557 2-甲氧基, 98%
hzM120570 2--5-硝基, 96%
hzM120571 4-甲氧基, 98%
hzM121805 2-甲氧基-5-硝基-4-, 97%
hzM122668 2-甲氧基-4-, 98%
hzM124103 2-(乙酰氨基)-4-, 98%
hzM124329 3--N-氧化物, 98%
hzM124583 2-甲氧基-3-(三氟), >98.0%(GC)
hzM124675 4--2-甲醛, 97%
hzM124763 6--2-甲酸甲酯, 96%
hzN106588 4-(4-硝基苄基), 98%
hzN107157 盐酸烟酰, >95.0%(T)
hzN119979 4-硝基-N-氧化物, 98.0 %
hzN120467 3-硝基-2-硫醇, 96%
hzP100814 -2,3-二羧酸, 99%
hzP101920 2-甲酸, 99%
hzP101990 4-乙酸盐酸盐, 98%
hzP105912 -2-甲醛, 98%
hzP105913 -4-甲醛, 99%
hzP106151 3-磺酸, 98%
hzP106578 2-甲醇, 98%
hzP106583 2-基, 98%
hzP106768 4-苯磺酸鎓, 98%
hzP106866 2-乙酸盐酸盐, 99%
hzP106875 -3,5-二羧酸, 98%
hzP106876 2-甲酸, 98%
hzP106881 1-(2-基)哌嗪, 97%
hzP107146 2-(氨), 99%
hzP107547 3-乙酸盐酸盐, 99%
hzP107716 2-苯基, 98%
hzP107906 2,6-二甲醇, 97%
hzP109210 3-, 99.5%(GC)
hzP109609 2,6-二羧酸, 99%
hzP110335 4-基, 98%
hzP111453 五, 98%
hzP111512 , for HPLC,≥99.9%
hzP111513 , 无水级,99.8%
hzP111516 , ACS, ≥99.0%
hzP113741 1-(4-基)哌嗪, 97%
hzP119372 2-特戊酰胺基, 97%
hzP119966 2-基三溴砜, 98.0 %
hzP119980 2,3-二羧酸酐, 98%
hzP120087 1H-吡咯并[3,2-c], 98%
hzP121066 4-基, 97%
hzP122673 3-甲酸酐, 97%
hzP124051 氢溴酸盐, 98%
hzS106808 三氧化硫-复合物, 97%
hzT100693 2,2′:6′,2′′-三, 98%
hzT107458 6-三氟烟酸, 97%
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文献和实验相关专题 MEM细胞培养基 无血清培养基可以提供细胞贴壁需要的一些基质,本文总结了利用无血清培养基OPTI-MEM进行贴壁细胞的脂质体转染试验材料,步骤、个人经验以及问题分析。 贴壁细胞的脂质体转染 一、实验材料 1、宿主细胞CHO(贴壁细胞) 2、脂质体LIPOFECTAMINE 2000(Invitrogen 公司) 3、6孔细胞培养 版 4、无血
方法。 脂质体型转染 一、注意事项 1. 转染试剂的用量 2. siRNA(小干扰RNA)的用量 3. 转染时的细胞密度 4. 转染时的操作顺序 5. 细胞与转染试剂 /siRNA(小干扰RNA)复合物的温浴的时间 二、转染步骤 选用生理状态良好的细胞对提高转染效率很重要. siRNA和脂质体的用量和两者的比例可在推荐范围内适当调整。 1. 转染前一天, 将细胞接种在 6孔板上,24小时贴壁后细胞密度达到70%-90%; 2. 转染前,用基础培养基opti-MEM
板液体每孔在 2ml 左右,不宜太多,或者太少。取两个 1.5mlEP 管,记为 A 管,B 管,每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I,然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000,B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA(见买来的 siRNA 说明书),然后静置 5min,混合在一起,静置 20min,用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内,混匀; 将六孔板里的细胞的液体吸出,用 PBS 清洗两遍; 将 ABC 混合液 2ml
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