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25
- 英文名：
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647
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详见说明书
- 供应商：
上海博湖
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详见说明书
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详见说明书
公司产品仅供科研产品名称：Alexa Fluor 647标记的驴抗豚鼠IgG
英文名称：Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647
应用: Flow-Cyt=1:100-1000;IF=1:100-1000;not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
浓度: 2mg/1ml
蛋白分子量: 150kDa
纯化方法: affinity purified by Protein A
| 产品名称 | Alexa Fluor 647标记的驴抗豚鼠IgG |
| 英文名称 | Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 |
| 货号 | BH-DB9031 |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL～1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL～0.5 mL |
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用：
1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7 2～7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1．单纯固定液
(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效
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抗紧张素‖受体︱型自身抗体 英文名称： Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 英文缩写： AT1R-AA 规格： 48T/96T Ophiopogonin D 中文名：麦冬皂苷D 分子式：C44H70O16
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Alexa Fluor 647标记的驴抗豚鼠IgGDibucaine hydrochloride
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文献和实验相关实验
保持优异的水溶性，为该波段最亮的橙色荧光染料。例如：同等的标记程度下，CF543 标记的羊抗鼠IgG抗体的亮度高于用Alexa Fluor 546 标记的2~10倍。CF 555、AlexaFluor 555、Tetramethylrhodamine(TAMRA) 等匹配Cy3滤光片的橙色荧光染料；红色（568-594nm处激发）CF 568、Alexa Fluor® 568,ATTO 565, Rhodamine Red等568nm处红色荧光染料；CF 568染料耐光性最好；高效水溶
'）2 Fragment（Alexa Fluor® 555 Conjugate）#4413 Anti-Rabbit IgG（H+L）， F（ab'）2 Fragment（Alexa Fluor® 647 Conjugate）#4414 抗小鼠： Anti-Mouse IgG（H+L）， F（ab'）2 Fragment（Alexa Fluor® 488 Conjugate）#4408 Anti-Mouse IgG（H+L）， F（ab'）2 Fragment（Alexa Fluor
Laboratories、Sigma、Bio-Rad 及DAKO公司。 对于免疫荧光检测实验（包括免疫细胞化学及免疫组织化学），应用最广泛的是耦联有Alexa Fluor系列染料的抗体（如Alexa Fluor 488, 546, 568, 594, 596, 647, 633）、花青染料（Cyanine）系列标记的抗体（如Cy2, Cy3, and Cy5）、FITC及罗丹明（Rhodamine）。其中对于Alexa Fluor标记的二抗，推荐选择Invitrogen 公司
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