转膜液（tris/甘氨酸）-粉剂

【求助】western 转膜 mark转不上

zhangqiang6612 最近做wb时，转膜后mark很淡，几乎没有 转膜条件：300mA，恒流 45min，分子量大小40kd 丽春红染膜后，条带很淡 转膜液配方：Tris 5.8g，甘氨酸2.9g,甲醇200ml/L,补足液体(去离子水)至1000ml 请高位高手指点 蓝天飞龙 有图吗？ zhanghai123

蛋白质印迹（Western blot）实验方案

蛋白质印迹流程点击下载：蛋白质印迹实验方案溶液和试剂●裂解缓冲液这些缓冲液可在 4 ℃ 下保存数周，或者以分装形式在 -20 ℃ 下保存长达 1 年。Nonidet-P40 (NP40) 缓冲液150 mM NaCl1.0% NP40（可用 0.1% Triton X-100 替代）50 mM Tris-HCl pH 8.0蛋白酶抑制剂RIPA 缓冲液（放射免疫沉淀试验缓冲液）150 mM NaCl1.0% NP-40 或 0.1% Triton X-1000.5% 脱氧胆酸钠0.1% SDS

各类western转膜条件

时间： 85 min 转膜设备: BIO-rad 转膜设备。其间，准备一个冰盒，将电泳槽半埋到冰里。 转膜液的配制：（2.92 g甘氨酸，5.8 g tris，0.375 g SDS，200 ml甲醇，用双蒸水定容到1 L）   蛋白来源：宫颈癌细胞 蛋白名称：保密 蛋白分子量：60 kD WB用膜类型、孔径：PVDF膜 0.45 uM 转膜方式（恒压、恒流）：恒流，按膜的面积来算电流，标准大小的膜-60 mA/张 （8.2 cm x