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- 2025年07月15日
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41
- 英文名：
Goat Anti-human IgG/PE-Cy5.5
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
公司产品仅供科研产品名称：PE-Cy5.5标记的羊抗人IgG
英文名称：Goat Anti-human IgG/PE-Cy5.5
应用: IF=1:100-1000;not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
浓度: 2mg/1ml
蛋白分子量: 160kDa
纯化方法: affinity purified by Protein A
| 产品名称 | PE-Cy5.5标记的羊抗人IgG |
| 英文名称 | Goat Anti-human IgG/PE-Cy5.5 |
| 货号 | BH-DB8801 |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL～1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL～0.5 mL |
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用：
1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7 2～7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1．单纯固定液
(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效
以下是PE-Cy5.5标记的羊抗人IgG的相关产品：
3,3-Dimethylacrylic acid 541-47-9 中文名：千里光酸 分子式：C5H8O2 兔子紧张素1型受体(AT1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Campsiketalin 93675-96-8 分子式：C10H20O4 Rat von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 大鼠性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒
Macranthoin G 1
Tokinolide B 112966-16-2 分子式：C24H28O4 组织KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定性检测试剂盒20次
Methyl 4-O-feruloylquinate 19
Trehalose 99-20-7 中文
大鼠三0酸肌醇(IP3)ELISA试剂盒 ，英文名： IP3 ELISA Kit
Mouse androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 小鼠雄(ASD)ELISA试剂盒
RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 大鼠高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHA(Humanhemagglinin)ELISAKit人血凝素规格：48T/96T
细胞半胱氨酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性荧光定量检测试剂盒20次
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小鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒 ，英文名： LR/Ob-R ELISA Kit
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人多巴胺D1受体(D1R)免疫试剂盒 Human D1R ELISA Kit
Ratmelanocyteaibody,MCAbELISAKit大鼠黑色素细胞抗体(MCAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T
DNA定向连接克隆完全试剂盒(包括双内切酶)1次
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PE-Cy5.5标记的羊抗人IgG兔骨桥素(OPN)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human ypsinogen II (y- II) ELISA Kit 人胰蛋白酶原Ⅱ(y-Ⅱ)ELISA试剂盒
Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgGaibody,EHFIgGELISAKit 人抗流行性出血热病毒抗体IgG(EHF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISA试剂盒人谷胱甘肽硫转移酶pi基因(GSTpi)ELISA试剂盒规格：96T/48T
组织单胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量检测试剂盒20次
HumanMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit人Smad7ELISA试剂盒规格：96T/48T
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文献和实验PriCells: 藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE-标记蛋白A方法
藻红蛋白标记抗体的方法：1. 巯基化藻红蛋白（PE）的制备；（1）将600μl浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中；（2）将以上混合液和1.2ml pH6.8的PB混合，而后装入透析袋置入50mmol/L pH6.8的PB中于4℃透析，过夜；（3）再换用pH7.5 PB透析6h。每个PE分子中可结合8个巯基；2. 巯基PE-IgG的制备；（1）将30μl浓度为1.1mg/ml的异双功能试剂SPDP的乙醇溶液，加入到700μl
可以将干扰扣除，但补偿值越大，补偿后的信号分辨率会降低越厉害。最好选择很少或者没有重叠的荧光基团，以最大限度减少这种渗漏。不同激光激发的染料是首选，如PE和APC，但在某些情况下，这可能与尽量选择亮的荧光素的规则是冲突的。如在进行四色分析时，经常会将PE-Cy5标记的抗体与APC标记的抗体搭配使用。因为Cy5的激发波长与APC的激发波长相近，所以PE-Cy5与APC均可被红色激光（640nm）所激发，而两者的发送光谱也比较接近，导致PE-Cy5与APC的颜色补偿很难调整。相反，由于PE-Cy5.5中的
抗体二抗上连接有荧光染料。直接标记染色背景低，实验程序少尽量减少实验工序和过程，以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内，建议尽量用直接标记的抗体进行实验。 3、流式抗体荧光标记的选择： 如果实验中检测单一指标：不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。以某仪器为例：PE ＞APC ＞PE-Cy5 ＞PerCP ＞FITC ＞PerCP-Cy5.5，通常来说，PE最强，适用于弱表达抗原。FITC强度较弱，适用于强表达抗原，使用范围比较广。用户需根据检测的目标蛋白进行具体选择。 如果同时检测多个
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