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深圳子科生物
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100T
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文献和实验为茚三酮的水合物。是灵敏的氨基酸显色试剂。α -氨基酸与水合茚三酮一起加热显蓝紫色(脯氨酸和羟脯氨酸显黄色),称此为水合茚三酮反应。此反应应用于纸层析及滤纸电泳的氨基酸和肽的测定,以及氨基酸自动定量分析等。
实验55 氨基酸含量的测定(茚三酮比色法) 原理 凡含有自由氨基的化合物,如蛋白质、多肽、氨基酸的溶液与水合茚三酮共热时,能产生紫色化合物,可用比色法进行测定。氨基酸与茚三酮的反应分两个步骤。第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛、茚三酮被还原成还原型茚三酮;第二步是所形成的还原型茚三酮与另一个茚三酮分子和NH3缩合生成有色物质。
一、氨基酸分析方法分类 氨基酸分析按其分离和检测方法的不同可分为三大类型。第一类是基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生、光度法测定的离子交换色谱法(IEC)。此类方法由Stein和Moore两人1958年发明,并于1972年获诺贝尔奖,是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。第二类是所有基于反相色谱分离、柱前衍生、荧光或紫外检测的高效液相法(HPLC)。第三类是阴离子交换分离直接安培法检测的离子色谱法IC,严格说来,阴离子交换和阳离子交换都叫“IEC”,在此将阴离子交换分离、安培检测
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