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上海谷研
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产品名称：GsuI (BpmI) (5 U/µL)
Enzyme:GsuI(BpmI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferB
OptimalReactionTemperature:30°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:NotCpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, dcmmethylation-sensitive
ThermoScientificGsuI(BpmI)restrictionenzymerecognizesCTGGAG(16/14)^sitesandcutsbestat30°CinBbuffer.SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.Isoschizomers:BpmI.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features:•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesNote:Incubationat37°Cresultsin70%activity.GsuIrequiresonlyMg2+foritsactivity,butisstimulatedbyS-adenosylmethionine.0.01mMS-adenosylmethioninegivesa2-foldincreaseinactivity.GsuImayremainassociatedwiththecleavedDNA.ThismaycauseDNAbandshiftingduringelectrophoresis.ToavoidatypicalDNAbandpatterns,usethe6XDNALoadingDye&SDSSolutionforsamplepreparationorheatthedigestedDNAinthepresenceofSDSpriortoelectrophoresis.GsuIisblockedbyoverlappingdcmmethylation.Toavoiddcmmethylation,useadam-,dcm-strain,suchasGM2163.Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
GsuI (BpmI) (5 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
ACKR3 Polyclonal AntibodyCaspase-5活性测定试剂盒英文: ACKR3 Polyclonal Antibody细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD，与ICE有51%的同源性，在过量表达时可诱导凋亡发生。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA)，释放出游离的胺pNA，后者呈黄色在405nm具有最大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定，吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。反应体系100微升，试剂盒提供的试剂，除标准曲线外可进行50或100次样品测定。
ATG9B Polyclonal Antibody细胞生物学>细胞英文: ATG9B Polyclonal Antibody
MAP2K6 Monoclonal Antibody人慢性髓系白血病细胞；K562宿主: Mouse形态特性：淋巴母细胞样
HES5 Polyclonal Antibody人胚肺成纤维细胞；WI-38英文: HES5 Polyclonal Antibody生长特性：贴壁生长
LMNB2 Monoclonal Antibody小鼠单核巨噬细胞白血病细胞；RAW264.7宿主: Mouse形态特性：不规则圆形
WISP2 Polyclonal AntibodySV40T转化人脐静脉内皮细胞；PUMC-HUVEC-T1英文: WISP2 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
SDC4 Polyclonal AntibodyJurkat,CloneE6-1人T淋巴细胞白血病细胞英文: SDC4 Polyclonal Antibody形态特性：淋巴母细胞样
HDAC3 Polyclonal Antibody293T，人胎肾细胞英文: HDAC3 Polyclonal Antibody生长特性：贴壁生长
HSD3B2 Polyclonal Antibody人急性早幼粒白血病细胞；HL-60英文: HSD3B2 Polyclonal Antibody形态特性：髓母细胞样
AFP Polyclonal Antibody人肺癌细胞；A549英文: AFP Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
HSPA5 Monoclonal Antibody人急性单核细胞白血病细胞；THP-1宿主: Mouse形态特性：单核细胞
CCND1 Polyclonal Antibody小鼠胚胎成纤维细胞，NIH3T3英文: CCND1 Polyclonal Antibody形态特性：成纤维细胞样
NUP98 Monoclonal Antibody小鼠黑色素瘤细胞；B16英文: NUP98 Monoclonal Antibody形态特性：梭形
WDR45 Polyclonal Antibody人口腔表皮样癌细胞；KB英文: WDR45 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
CASP9 Polyclonal Antibody小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞)；YAC-1英文: CASP9 Polyclonal Antibody形态特性：淋巴母细胞样
CAPN2 Polyclonal Antibody小鼠前列腺癌细胞；RM-1英文: CAPN2 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
GsuI (BpmI) (5 U/µL)人基质金属蛋白酶抑制剂2elisa检测试剂盒
英文名称:Human TIMP-2 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:15 pg/ml
检测目标:TIMP-2
应用:Sandwich ELISA
Enzyme:GsuI(BpmI)
保存温度:-20℃
货期:2-3天
CompatibleBuffer:10xBufferB
OptimalReactionTemperature:30°C
SensitivetoHeatInactivation::Yes
MethylationSensitivity:NotCpGmethylation-sensitive, Notdammethylation-sensitive, dcmmethylation-sensitive
ThermoScientificGsuI(BpmI)restrictionenzymerecognizesCTGGAG(16/14)^sitesandcutsbestat30°CinBbuffer.SeeReactionConditionsforRestrictionEnzymesforatableofenzymeactivity,conditionsfordoubledigestion,andheatinactivationforthisandotherrestrictionenzymes.Note:AlsoavailableasaFastDigestenzymeforrapidDNAdigestion.Isoschizomers:BpmI.ThermoScientificconventionalrestrictionendonucleasesarealargecollectionofhighqualityrestrictionenzymes,optimizedtoworkinoneofthebuffersoftheFiveBufferSystem.Inaddition,theuniversalTangobufferisprovidedforconvenienceindoubledigestions.Alloftheenzymesexhibit100%activityintherecommendedbufferandreactionconditions.Toensureconsistentperformance,ThermoScientificrestrictionenzymereactionbufferscontainpremixedBSA,whichenhancesthestabilityofmanyenzymesandbindscontaminantsthatmaybepresentinDNApreparations.Features:•Superiorquality—stringentqualitycontrolandindustryleadingmanufacturingprocess•Convenientcolor-codedFiveBufferSystem•IncludesuniversalTangobufferfordouble-digestions•BSApremixedinreactionbuffers•WideselectionofrestrictionendonucleasespecificitiesNote:Incubationat37°Cresultsin70%activity.GsuIrequiresonlyMg2+foritsactivity,butisstimulatedbyS-adenosylmethionine.0.01mMS-adenosylmethioninegivesa2-foldincreaseinactivity.GsuImayremainassociatedwiththecleavedDNA.ThismaycauseDNAbandshiftingduringelectrophoresis.ToavoidatypicalDNAbandpatterns,usethe6XDNALoadingDye&SDSSolutionforsamplepreparationorheatthedigestedDNAinthepresenceofSDSpriortoelectrophoresis.GsuIisblockedbyoverlappingdcmmethylation.Toavoiddcmmethylation,useadam-,dcm-strain,suchasGM2163.Formethylationsensitivity,refertoproductspecifications.
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
GsuI (BpmI) (5 U/µL)在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
ACKR3 Polyclonal AntibodyCaspase-5活性测定试剂盒英文: ACKR3 Polyclonal Antibody细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD，与ICE有51%的同源性，在过量表达时可诱导凋亡发生。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA)，释放出游离的胺pNA，后者呈黄色在405nm具有最大吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定，吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。反应体系100微升，试剂盒提供的试剂，除标准曲线外可进行50或100次样品测定。
ATG9B Polyclonal Antibody细胞生物学>细胞英文: ATG9B Polyclonal Antibody
MAP2K6 Monoclonal Antibody人慢性髓系白血病细胞；K562宿主: Mouse形态特性：淋巴母细胞样
HES5 Polyclonal Antibody人胚肺成纤维细胞；WI-38英文: HES5 Polyclonal Antibody生长特性：贴壁生长
LMNB2 Monoclonal Antibody小鼠单核巨噬细胞白血病细胞；RAW264.7宿主: Mouse形态特性：不规则圆形
WISP2 Polyclonal AntibodySV40T转化人脐静脉内皮细胞；PUMC-HUVEC-T1英文: WISP2 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
SDC4 Polyclonal AntibodyJurkat,CloneE6-1人T淋巴细胞白血病细胞英文: SDC4 Polyclonal Antibody形态特性：淋巴母细胞样
HDAC3 Polyclonal Antibody293T，人胎肾细胞英文: HDAC3 Polyclonal Antibody生长特性：贴壁生长
HSD3B2 Polyclonal Antibody人急性早幼粒白血病细胞；HL-60英文: HSD3B2 Polyclonal Antibody形态特性：髓母细胞样
AFP Polyclonal Antibody人肺癌细胞；A549英文: AFP Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
HSPA5 Monoclonal Antibody人急性单核细胞白血病细胞；THP-1宿主: Mouse形态特性：单核细胞
CCND1 Polyclonal Antibody小鼠胚胎成纤维细胞，NIH3T3英文: CCND1 Polyclonal Antibody形态特性：成纤维细胞样
NUP98 Monoclonal Antibody小鼠黑色素瘤细胞；B16英文: NUP98 Monoclonal Antibody形态特性：梭形
WDR45 Polyclonal Antibody人口腔表皮样癌细胞；KB英文: WDR45 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
CASP9 Polyclonal Antibody小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞)；YAC-1英文: CASP9 Polyclonal Antibody形态特性：淋巴母细胞样
CAPN2 Polyclonal Antibody小鼠前列腺癌细胞；RM-1英文: CAPN2 Polyclonal Antibody形态特性：上皮样
GsuI (BpmI) (5 U/µL)人基质金属蛋白酶抑制剂2elisa检测试剂盒
英文名称:Human TIMP-2 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:15 pg/ml
检测目标:TIMP-2
应用:Sandwich ELISA
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