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- 2025年10月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
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室温,12个月
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50
- 供应商：
深圳子科生物
- 规格：
2×100ml
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文献和实验过硫酸胺 0.1 g ，加超纯水1.0 mL 溶解后，4 ℃ 保存，保存时间为 1 周。（-20 ℃长期保存） 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中，定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS（2L） NaOH 调 pH 值至 7.4，定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后，分装于 1.5 mL 离心管中，4 ℃ 可保存数周，-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存，1 次溶液可重复
:94℃5 min， 72℃6 min。取4μl PCR扩增产物和1μl 溴酚兰上样缓冲液在1. 5%琼脂糖凝胶上电泳，电压4V / cm，电泳2h[ 3 ] 。2 结果2. 1 质粒DNA的定量及杂质检测 表2结果显示:是否使用溶液Ⅰ对实验基本上没有影响，溶液Ⅱ中的NaOH直接关系到所提取质粒DNA 的量，溶液Ⅲ中的醋酸钾主要是与SDS (十二烷基硫酸钠)作用生成PDS(十二烷基硫酸钾) ，从而使大部分蛋白质沉淀。表2 不同方法提取的质粒DNA的吸光度2. 2 质粒DNA经sma I单酶切后电泳
大于 109 计数/分/μl。六、杂交Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式，即探针为液相，被杂交 DNA 为固相。杂交发生于一定条件的溶液（杂交液）中并需要一定的温度，可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买，不同的杂交液配方相差较大，杂交温度也不同。下面给出的为一杂交液配方：PEG 6000 10%；SDS 0.5%；6×SSC；50% 甲酰胺。 该杂交液的杂交温度为 42 ℃。1．预杂交NC 膜浸入 2× SSC 中 5 min，在杂交瓶中加入杂交
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