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文献和实验Oxalyticase Dissolve in 0.1 M NaCl, 0.02% Na azide, 50% glcyerole Store aliquots (1 ml) at 20o C in common freezer for stock solutions 上一篇:ALPHA FACTOR ARREST AND RELEASE 下一篇:GLASS BEADS
血管,取皮质灰质,用匀浆机将其制成匀浆。 2. 用10μg/ml DNaseⅠ和1mg/ml胶原酶溶液,37℃,消化脑组织1h。吸去上清,将沉淀悬浮于250g/L BSA的PBS中,4000r/min离心10min,去除悬浮的脂肪细胞碎片和髓磷脂。 3. 将沉淀物重新悬浮于上述消化液中,37℃消化1-3h。消化产物先过230μm尼龙筛,再过150μm尼龙筛,以去除大血管、细胞碎片等。 4. 收集微血管。将滤过液通过60μm尼龙筛,以便收集微血管内皮细胞。将筛子
的方法进行质粒DNA的提取,所用具体试剂见表1: ①挑取单菌落,接种于4. 0mlLB (含氨苄青霉素)液体培养基中, 37℃、250 rpm振荡培养过夜(约12~14h) 。②取1. 5ml培养物加入Eppendorf管中,室温12000g离心1min,弃上清。③将细菌沉淀重悬于100μl预冷的溶液Ⅰ中,剧烈振荡,使菌体分散混匀。④加200μl新鲜配制的溶液Ⅱ,颠倒数次混匀(不要剧烈振荡) ,并将离心管放置于冰上2min。⑤加入150μl预冷的溶液Ⅲ,将管温和颠倒数次混匀冰上放置3min。⑥加入
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