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- ZK-L1815
- 2025年08月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
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50
- 供应商：
深圳子科生物
- 规格：
500ml
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文献和实验外周血DNA为模板，PCR扩增凝血因子FⅧ基因的583bp特异片段产物，其中包含MspⅠRFLP多态位点，经MspⅠ酶切后，琼脂糖凝胶电泳检测等位片段的长度（583 bp或360 bp+223 bp），以此为遗传标记进行连锁分析，判断胎儿是否得到了带有缺陷FⅧ基因的染色体，从而做出间接基因诊断。 二、材料及试剂 1. DNA（50ng/μl）、引物Ⅰ和Ⅱ（20 μΜ）、TaqDNA聚合酶（5 U/μl）10×PCR反应缓冲液、 dNTP（2.5 mM）、灭菌蒸馏水、液体石蜡、限制性内切酶MspⅠ
酶 5. 琼脂糖 6. DNA Marker 7. tip 8.eppendorf管 9. 微量移液器 附试剂的配制： 1. 10×PCR缓冲液 500mmol/L KCl 100mmol/L Tris·HCl(Ph8.3,室温) 15mmol/L MgCl2 0.1% 明胶 2. 4×dNTP 10mmol/L dATP 10mmol/L dCTP
限制性内切酶的作用特点以及使用方法。掌握 DNA 琼脂糖凝胶电泳的操作与 DNA 片段的回收。【实验原理】目的 DNA 被限制性核酸内切酶水解后产生大小不同的 DNA 片段，这些 DNA 片段在一定浓度的琼脂糖凝胶电泳上可以按分子大小不同而分开，并可以用不同的方法再把这些 DNA 片段从琼脂糖凝胶上回收回来。限制性核酸内切酶水解 DNA 的活性与酶的单位数，缓冲液的离子强度和反应温度有关。【实验试剂与器材】限制性内切酶10×内切酶缓冲液琼脂糖（一）DNA 分子的酶切消化【实验方法与步骤】DNA
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