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- 2025年12月16日
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上海谷研
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瓶
储存条件:-20℃，有效期5年
单位:瓶
pET-28a(+)是一种常用的融合蛋白类型原核高效表达载体，含有抗卡那霉素基因。表达由宿主细胞提供的T7RNA聚合酶诱导。宿主菌：建议克隆用E.coliDH5α或TOP10做受体菌；表达用E.coliBL21(DE3)或BL21(DE3)pLysS做受体菌。
作用及原理：
⒈溶液I—溶菌液：
溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。
EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。
⒉溶液II－NaOH－SDS液：
NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。
但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。
pET-28a（+）在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。
SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：
（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。
（2）解聚细胞中的核蛋白。
（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。
根据不同浓度的氯化钠溶液对DNA和蛋白质的溶解度不同原理，可以在提取不同类型DNA使用中加以利用。
1.Nacl是常用的盐析材料之一，盐析即在高浓度Nacl溶液中，蛋白质析出的现象。原理如下
（1）Nacl溶液与蛋白质争夺水分子，破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜；
（2）Nacl溶液大量中和蛋白质颗粒上的电荷，从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出；
2.不同浓度下DNA分子构象（三维结构）不同，不同的构象溶解度也不同。
（1）当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最小，因此改变NaCl溶液的浓度既能使DNA溶解也能使其析出；
（2）DNA在不同浓度的氯化钠溶液中随着氯化钠的浓度不断升高；
3.所以可以使用适当的高浓度Nacl溶液，使得蛋白质析出，而DNA溶解度较大，通过高速离心，取上清并去除沉淀，进而去除蛋白质。
DNA沉淀剂：
原则：不与DNA反应，对其无影响。
1.纯乙醇（二倍体积比）；效率高，需要放置的时间短，在公司用Kit提取的时候，没有放置直接进行下一步；确定是价格相对昂贵。
2.95%乙醇，价格相对于纯乙醇便宜，但是会损失DNA；
3.异丙醇（0.6倍体积）；
（1）普通细胞上清液体，静止15-30min即可沉淀；
（2）对于含量低，或者组织（比如我现在经常提取的小鼠的肝脏中的Total和cccDNA），则最好在-20℃放置2h或者以上，
本人提取肝脏组织DNA时候，最长时间放置了三天，对结果并无影响；上周提取细胞中cccDNA的时候，室温放置了15min，结果提出的DNA含量也挺高的，而且之后的Southern结果也很成功。我猜测可能是含量高，所以时间短点也可以，但是如果时间不是很着急，还是按照规定的时间来做比较保险。
以下是公司正在热销的产品：
NFS1 Polyclonal Antibody资源名称：L-WRN英文: NFS1 Polyclonal Antibody 种属 ：Mus musculus，subcutaneous connective tissue; areolar and adipose
EFHC1 Polyclonal Antibody资源名称：正常人表皮角质形成细胞英文: EFHC1 Polyclonal Antibody 种属 ：NHEK
RGS20 Polyclonal Antibody资源名称：小鼠胰岛素瘤β细胞英文: RGS20 Polyclonal Antibody 种属 ：NIT-1
SORT1 Polyclonal Antibody资源名称：人胶质母细胞瘤细胞英文: SORT1 Polyclonal Antibody 种属 ：KS-1
SLC22A11 Polyclonal Antibody资源名称：McCoy's 5a完全培养基：英文: SLC22A11 Polyclonal Antibody 种属 ：McCoy's 5a complete medium
KCNV2 Polyclonal Antibody资源名称：人晶状体上皮细胞系英文: KCNV2 Polyclonal Antibody 种属 ：HLEB3
FANCA Polyclonal Antibody资源名称：成人真皮成纤维细胞英文: FANCA Polyclonal Antibody 种属 ：HDF-a
GNAO1 Polyclonal Antibody资源名称：鼠B淋巴瘤细胞英文: GNAO1 Polyclonal Antibody 种属 ：6A8/6F10/1A6
CDC5L Polyclonal Antibody资源名称：tTA基因修饰的小鼠睾丸畸胎瘤细胞（B类）英文: CDC5L Polyclonal Antibody 种属 ：F9-CAG-tTA-1A3
SESN3 Polyclonal Antibody资源名称：人肺巨细胞癌细胞英文: SESN3 Polyclonal Antibody 种属 ：PLA-801D
GSTM4 Polyclonal Antibody资源名称：人子宫内膜低分化腺癌细胞英文: GSTM4 Polyclonal Antibody 种属 ：EAG3
DCP1A Polyclonal Antibody资源名称：小鼠乳腺上皮细胞英文: DCP1A Polyclonal Antibody 种属 ：EpH4-Ev
CNDP1 Polyclonal Antibody资源名称：人类淋巴母细胞瘤细胞英文: CNDP1 Polyclonal Antibody 种属 ：HLCL14C1
PRKG2 Polyclonal Antibody资源名称：小鼠骨髓瘤细胞系英文: PRKG2 Polyclonal Antibody 种属 ：Lys30-51VH/Hu
MTOR Polyclonal Antibody资源名称：鼠颊黏膜鳞癌细胞英文: MTOR Polyclonal Antibody 种属 ：Rca-B
XRCC4 Polyclonal Antibody资源名称：人纤维肉瘤细胞系英文: XRCC4 Polyclonal Antibody 种属 ：JH-2
pET-28a（+）人基质金属蛋白酶3elisa检测试剂盒
英文名称:Human MMP-3 ELISA KIT
反应性:Human
样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant
灵敏度:15 pg/ml
检测目标:MMP-3
应用:Sandwich ELISA
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文献和实验, either alone or in combination with chemo- or radiotherapy at the more advanced stages. However, many patients present with metastatic disease at the time of diagnosis. Both computed tomography (CT) and positron emission tomography (PET) using fluorodeoxyglucose (FDG) play
什么是PET 树脂 ---PET是英文Polyethylene terephthalate的缩写，PET的中文意思是聚对苯二甲酸乙二醇酯。PET是以石油中的对苯二甲酸和乙二醇为原料，在高温高真空条件下进行化学反应而形成的树脂之一。PET瓶具有综合性能优良的特点，在饮料行业被广泛使用。 核医学 ---PET是英文Positron Emission Tomography的缩写，PET的中文意思是正电子发射计算机断层扫描。PET是核医学发展的一项新技术。 PET瓶片－－
PET and PET/CT in the Management of Thyroid Cancer
The introduction of PET(-CT) has brought about a major paradigm shift in the management of thyroid carcinoma, especially from the diagnostic standpoint. From the viewpoint of patient management, the areas where it has made significant impact
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