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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
51
- 英文名:
Precast Native PAGE Gel 8%, 15 wells
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 规格:
瓶
单位 盒
别名 预制胶|蛋白预制胶
英文名称 Precast Native PAGE Gel 8%, 15 wells
Precast-Gel预制胶是公司开发的高性能低成本聚预制凝胶。预制胶将凝胶事先配制好,使用者拿来即可上样进行电泳,减去了用户自配凝胶的麻烦,节约了大量的时间。
Precast-Gel预制胶默认送Running buffe。
Precast-Gel具有如下特点:
★ 特制凝胶和缓冲液配方,分辨率高,条带清晰,电泳效果极佳
★ 保存期长,4℃储存达到18个月胶夹打开极为轻松,无需起撬工具
★ 兼容目前市场各种电泳槽, 如BIORAD,六一,天能和君意东方等
★ 可用于SDS变性及非变性电泳
★ 10%, 12%, 15%及4-15%梯度等多种不同浓度供选择; 1.5mm胶厚度;
★ 电泳时间短,在150V电压下, 电泳40-50分钟即可完成
★ 出售时免费附送足量的电泳缓冲液。
★ 玻璃电泳板蛋白吸附率低,电泳效果更好。
产品参数:
| 产品名称 | Precast-Gel非变性蛋白预制胶 浓度8% 15孔 |
| 英文名称 | Precast Native PAGE Gel 8%, 15 wells |
| 货号 | BH-DB6765 |
注意事项:
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
操作步骤:
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
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温馨提示:
工作液与浓缩液选择的技巧,以及各自的优势。
1,工作液的优势:工作液操作方便,降低实验操作步骤,对于要求无菌的实验,降低染菌风险。
2,浓缩液的优势:浓缩液成本相对较低,实验范围更广,对于不要求无菌的实验,可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高,保存更加稳定。
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