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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
23
- 英文名:
Acetocarmine Solution
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
RT,避光,有效期1年
- 规格:
瓶
英文名称 Acetocarmine Solution
储存条件 RT,避光,有效期1年
醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。在观察植物细胞有丝分裂时,对染色体进行染色,需要用碱性染液,此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。花粉检测中,可以采用醋酸洋红检测花粉是否处于单核期。
Solarbio醋酸洋红染色液采用经典配方和进口染料配置,含高浓度乙酸和洋红,pH呈酸性,是很好的细胞核、线粒体染色剂。
产品参数:
| 产品名称 | 醋酸洋红染色液 |
| 英文名称 | Acetocarmine Solution |
| 货号 | BH-DB6657 |
注意事项:
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
操作步骤:
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
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温馨提示:
工作液与浓缩液选择的技巧,以及各自的优势。
1,工作液的优势:工作液操作方便,降低实验操作步骤,对于要求无菌的实验,降低染菌风险。
2,浓缩液的优势:浓缩液成本相对较低,实验范围更广,对于不要求无菌的实验,可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高,保存更加稳定。
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文献和实验在涂抹法与压碎法中,醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在煮沸的 45%醋酸中加洋红使之饱和,再加入微量的铁离子,便使醋酸洋红材料在为醋酸固定的同时,洋红将核或染色体染成红色。
附录I 染色液的配制 一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 (实验6,53) A液:美蓝(methylene blue) 0.6g 95%酒精 30ml B液:KOH 0.01g 蒸馏水 100ml 分别配制A液和B液,配好后混合即可。 二、齐氏 (Ziehl)石炭酸复红染色液 (实验6) A液:碱性复红(basic
四、醋酸洋红染液 将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。也可再加入1%~2%铁明矾水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。 五、硫堇染液(工作液) ①干液(硫堇):硫堇1g或2g溶于100mL 50%乙醇中,溶解后过滤备用; ②醋酸钠缓冲液:醋酸钠・3H2O 9.7g,巴比
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