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文献和实验而成。NTA能够通过四个位点牢固的螯合Ni2+从而减少纯化过程中Ni2+泄露到蛋白样品中。Ni-NTA纯化介质可以纯化任何表达系统(原核,酵母,昆虫细胞和哺乳动物细胞等表达系统)表达的天然或变性的His-标签蛋白。结合在介质上的蛋白可以通过低pH缓冲液、咪唑溶液甚至组氨酸溶液洗脱下来。 一、NI-NTA提纯操作步骤 1. 试剂和耗材准备: Bind Buffer;Wash Buffer;Elution Buffer;柱子;填料;等。 pET.wap
收到多少的蛋白呢? (Recovery– STREP-TAG® OUTPERFORMS HIS-TAG) 实验发现,使用 Strep-Tactin XT® 4Flow®进行纯化时,回收效率明显高于使用 Ni-NTA 进行的纯化。Strep-Tactin® XT 4Flow®可以回收得到 80%-90% 的蛋白,并且增大上样体积后,纯化效果不受影响。 相对而言,上样体积增加后,则会对使用标准 Ni-NTA 的纯化实验产生影响,但对使用 Ni Sepharose Excel 纯化的蛋白回收效率不产生影响
E.Z.N.A.® HP Total RNA Kit Spin Protocol Eukaryotic Cells and Tissues
buffer system allows more than 100 ug of RNA molecules greater than 200 bases to bind to the matrix. Cells or tissues are first lysed under denaturing conditions that practically inactivate RNases. Samples are then applied to the HiBind® spin columns
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