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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 英文名：
Streptavidin/PE-Cy5
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
产品名称：荧光素PE-Cy5标记链霉亲和素图片
英文名称: Streptavidin/PE-Cy5
应用: Flow-Cyt=1:500-5W;ICC=1:500-5W;IF=1:500-5W;not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
浓度: 1mg/ml
参数规格：
| 产品名称 | 荧光素PE-Cy5标记链霉亲和素图片 |
| 英文名称 | Streptavidin/PE-Cy5 |
| 货号 | YS-D7160 |
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
下列是荧光素PE-Cy5标记链霉亲和素图片的相关产品：
C1orf43 磷化细胞核因子 4-邻基-1-四萘酮
C1orf216神经丝蛋白 7--4-羟基
C1orf21死亡结构域蛋白NRH2 邻苄酯
C1orf198神经生长因子受体相关蛋白1 4-(羟基)咪唑
NFMOC尸20mg 3--4-氧基
LASS3 长寿相关基因lASS3抗体尤瑞克林 钯二水合物
LASS2 肿瘤转移抑制基因1抗体醋奥曲肽 2-酮
phospho-MAP1LC3A(Ser12) 磷化自噬微管相关蛋白轻链3抗体赖脯胰岛素 4-基噻唑-5-
LASS1 长寿相关基因lASS1抗体
荧光素PE-Cy5标记链霉亲和素图片MFAP3L 微丝相关蛋白3样体进口/国产CCNDBP1/GCIP 周期D结合蛋白1体
橙皮英文名称中药对照药材规格:20mg/支
MICA/MHC I MHC I类链相关蛋白A/组织相容性复合物1体进口/国产AFF4 淋巴细胞相关AF4样蛋白体
盐咪达普利进口/国产Calpain 1 钙蛋白酶1抗体含量：100748-200401
MHC class I antigen B 15 组织相关原HLAB15体进口/国产Cyclin K/CCNK 周期K体
盐艾司洛尔进口/国产Calpain 2
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文献和实验指标：确认流式细胞仪能检测多少个通道，流式抗体每个通道只能选择1种荧光素。各个通道之间的荧光素可以随意搭配。如实验者同时检测三个指标，可以在下图中绿色、黄色和红色三个通道中各选一个适当的荧光素标记，FITC、PE和PE-cy5。切忌所有指标选择同一个通道的荧光标记，以防止荧光的重叠和相互干扰，影响最后结果。因此，流式细胞仪的通道越多，同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多。常用荧光标记包括FITC, PE, PEcy5, PEcy5.5, APC等。 4、同型对照的选择： 流式
不会被 635 nm 激光激发 图 2 对比了 PE-Vio 615 与 PerCP-Cy5.5 染料的光谱扩展，以及两种荧光素对 APC 通道背景信号的影响。用美天旎的 MACSQuant®Analyzer 10，488 nm 激光激发下，滤光片设置为 655-730 nm 的 B3 通道中检测两种荧光素的信号。我们可以看到，PE-Vio 615 很大程度上减少了对 APC 通道灵敏度的影响，为 PerCP-Cy5.5 提供了更灵活的替代方案。 图 2：PE-Vio 615 与 PerCP
可以将干扰扣除，但补偿值越大，补偿后的信号分辨率会降低越厉害。最好选择很少或者没有重叠的荧光基团，以最大限度减少这种渗漏。不同激光激发的染料是首选，如PE和APC，但在某些情况下，这可能与尽量选择亮的荧光素的规则是冲突的。如在进行四色分析时，经常会将PE-Cy5标记的抗体与APC标记的抗体搭配使用。因为Cy5的激发波长与APC的激发波长相近，所以PE-Cy5与APC均可被红色激光（640nm）所激发，而两者的发送光谱也比较接近，导致PE-Cy5与APC的颜色补偿很难调整。相反，由于PE-Cy5.5中的
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