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现货
- 英文名:
Extracellular Acidification
- 保质期:
半年
- 供应商:
BestBio贝博
- 保存条件:
2-8度避光
- 规格:
200T
细胞外酸化检测试剂盒 BB-48311-200T
贝博® BBcellProbe® 细胞外酸化率(ECAR)检测试剂盒(Extracellular acidification Rate Assay Kit)是利用贝博® 合成的酸化检测荧光探针BBcellProbe® P61来检测细胞外酸化情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行细胞外酸化情况的动态实时测定。
细胞外酸化(Extracellular Acidification ;ECA)测量可以为糖酵解(glycolytic)活性研究提供丰富的信息,本试剂盒可用于代谢表征并确定具体的干预措施(如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控)如何影响糖酵解通量。
BBcellProbe® P61最大激发波长为 488nm,最大发射波长为 580nm。其荧光在碱性条件下强度较弱,反之酸性条件下变强,从而BBcellProbe® P61可被用于监测细胞外酸化的变化。在测定中,细胞外酸化率由荧光信号随时间的变化计算。细胞外酸化增加,荧光信号的变化率增加;反之,酸化减少,荧光信号的变化率降低。
BBcellProbe® P61与乳酸的这种反应是非破坏性且完全可逆的,BBcellProbe® P61没有细胞毒性,其是化学稳定的,惰性的,水溶性的和细胞不渗透的,不能透过完整的细胞膜。因此还可以同时与细胞耗氧率, 线粒体膜电位, ROS和细胞ATP 、LDH等检测的试剂结合使用,进行多参数检测。
用BBcellProbe® P61进行细胞外酸化检测方法及其简单,不需要适用特殊的仪器设备,只需要荧光酶标仪之类的荧光读板设备即可。
试剂盒用途:
贝博® BBcellProbe® 细胞外酸化率(ECAR)检测试剂盒(Extracellular acidification Rate Assay Kit)是利用贝博® 合成的酸化检测荧光探针BBcellProbe® P61来检测细胞外酸化情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行细胞外酸化情况的动态实时测定。
细胞外酸化(Extracellular Acidification ;ECA)测量可以为糖酵解(glycolytic)活性研究提供丰富的信息,本试剂盒可用于代谢表征并确定具体的干预措施(如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控)如何影响糖酵解通量。
BBcellProbe® P61最大激发波长为 488nm,最大发射波长为 580nm。其荧光在碱性条件下强度较弱,反之酸性条件下变强,从而BBcellProbe® P61可被用于监测细胞外酸化的变化。在测定中,细胞外酸化率由荧光信号随时间的变化计算。细胞外酸化增加,荧光信号的变化率增加;反之,酸化减少,荧光信号的变化率降低。
BBcellProbe® P61与乳酸的这种反应是非破坏性且完全可逆的,BBcellProbe® P61没有细胞毒性,其是化学稳定的,惰性的,水溶性的和细胞不渗透的,不能透过完整的细胞膜。因此还可以同时与细胞耗氧率, 线粒体膜电位, ROS和细胞ATP 、LDH等检测的试剂结合使用,进行多参数检测。
用BBcellProbe® P61进行细胞外酸化检测方法及其简单,不需要适用特殊的仪器设备,只需要荧光酶标仪之类的荧光读板设备即可。
| 货号 | 试剂盒名称 | 荧光颜色 | 检测波长 | 检测仪器 |
| BB-48211 | 细胞耗氧率检测试剂盒(OCR) | 红色 | 468nm/603nm | 荧光酶标仪(时间分辨) |
| BB-48311 | 细胞外酸化检测试剂盒(ECAR) | 橙色 | 488nm/580nm | 荧光酶标仪 |
| BB-483112 | 细胞外糖酵解检测试剂盒 | 绿色 | 488nm/516nm | 荧光酶标仪 |
| BB-48213 | 细胞缺氧检测试剂盒 | 绿色 | 488nm/518nm | 酶标仪/流式/光度计 |
| BB-48214 | 细胞缺氧检测试剂盒 | 红色 | 516nm/606nm | 酶标仪/流式/光度计 |
| BB-48901 | 细胞耗氧抑制剂AA | / | / | / |
| BB-94003 | 细胞耗氧激活剂FCCP | / | / | / |
| BB-48122 | 线粒体膜通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒 | 绿色 | 488nm/516nm | 酶标仪/流式/光度计 |
| BB-48119 | 线粒体膜流动性(fluidity)TMA-DPH荧光检测试剂盒 | 绿色 | 488nm/516nm | 酶标仪(偏振) |
| BB-4105 | 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法) | 绿/红 | 488nm/516nm | 流式/酶标仪/光度计 |
| BB-41051 | 线粒体膜电位检测试剂盒(Rho123法) | 绿色 | 488nm/516nm | 流式/酶标仪/光度计 |
| BB-41052 | 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10法) | 绿/红 | 488nm/516nm | 流式/酶标仪/光度计 |
| BB-41053 | 线粒体膜电位检测试剂盒(TMRE法) | 橙色 | 549nm/574nm | 流式/酶标仪/光度计 |
| BB-41054 | 线粒体膜电位检测试剂盒(TMRM法) | 橙色 | 549nm/573nm | 流式/酶标仪/光度计 |
| BB-4605 | 活性氧检测试剂盒 (ROS检测试剂盒) | 绿色 | 488nm/518nm | 流式/酶标仪/光度计 |
| BB-46052 | 活性氧检测试剂盒 (ROS检测试剂盒) | 红色 | 516nm/606nm | 流式/酶标仪/光度计 |
试剂盒用途:
- 细胞代谢研究;
- 测量活细胞中的糖酵解活性;
- 研究各种处理对细胞酸化量的影响;
- 研究基因修饰对细胞酸化量的影响;
- 探究细胞代谢变化与氧含量之间的联系;
- 直接评估药物处理的线粒体毒性。
- 细胞;贴壁细胞/悬浮细胞;
- 分离的细胞;
- 3D 培养物;组织;
- 分离的酶;
- 微生物;细菌/酵母/霉菌。
- 荧光强度测定;
关于仪器设置:
关于细胞培养:
- 温度对检测有较大影响。有条件的话,务必使用配有温度控制的酶标仪。
- 常规的荧光信号强度测量,使用基于单色仪或基于过滤器的酶标仪,最佳激发波长使用488 nm或514 nm,发射波长使用580-590 nm。可根据实际机器和样本选择信号最强的波长。
- 具有检测增益参数(PMT,Parameters)的通常设置为中或高。
- 一般使用底部读数bottom read。
关于细胞培养:
- 对于贴壁细胞,在200 μL培养基中的96孔板中接种细胞。在37 ℃ 的CO2培养箱中孵育过夜。
- 对于悬浮细胞,在检测当天在100 μL培养基中接种。
- 注意所需的接种密度取决于细胞类型。 我们推荐进行细胞接种密度预实验以确定最佳密度。通常从高细胞密度(通常为60,000-80,000个)开始,每孔的最佳细胞数一般为:贴壁细胞每孔80,000个细胞,悬浮细胞每孔5-6 x 105(96孔板)。
- 检测待测样品都设置3复孔。
- 注意始终在每个96孔板上留出至少6个孔,以免添加细胞作为空白对照和信号控制孔。
- 如果将细胞在CO2培养箱中培养过夜,则去除二氧化碳非常重要,残留的二氧化碳可能会导致酸化。在进行P61酸化检测之前先将培养板残余二氧化碳进行去除,方法是提前通过在37℃,湿度为95%的无二氧化碳培养箱中培养细胞约两个小时。
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在细胞培养实验过程中,大家是不是总会好奇别人家的实验总是做的又快又好,而自己做的实验又慢又难得做出自己满意的结果,搞得一天到晚也挺忙的,心想:我也很努力很认真啊,为啥效率总提不起来呢?其实,有时候并不是自己不努力,只是没有找对方法。做实验可不能光是埋头苦干,还要学会运用合适的检测试剂盒,这样就能事半功倍。如果你还在用 MTT,那就真的 OUT 了,MTT 花 4 小时才能得到的结果用 CCK-8 只需 1 小时,CCK-8 可用于细胞增殖和毒性分析,同 MTT 法相比,CCK-8 即开即用
fcm操作者联系一下,核实细胞数、加染色剂的时间以及其他特殊要求。 操作者一般都会给出分析结果。具体也可以和操作者联系,可以详细询问,这里不罗嗦。 我用的就是晶美的产品,就我个人的操作这方面已请教了许多人。仅看产品说明书上的操作步骤还是不行的,不够细。比如最基本的是在冰浴中操作就没有提到。但是现在我的麻烦在于流式细胞仪的操作者不知道双染和PI单染的操作有什么差别,所以不愿意给我作 cyc1sbs5: 单染和双染在使用流式细胞仪时的区别在于双染时需调整两种染料间的补偿,不过着需要一定的经验
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细胞外酸化率检测试剂盒ECAR
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