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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 供应商:
凯基生物
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
10 tests
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为 35~36kD 的 Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此 Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将 Annexin V 进行荧光素 APC 标记,以标记了的 Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。7-AAD(7-amino-actinomycin D)是一种核酸染料,它不能通过正常质膜,随着细胞凋亡、细胞死亡过程,质膜对 7-AAD 的通透性逐渐增加,结合细胞凋亡中 DNA 的有控降解,在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光,通过 7-AAD 标记 DNA 的强弱,将细胞分为三群:7-AAD 强为死亡细胞,7-AAD 弱是凋亡细胞,7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD 同 PI 有着相似的荧光特性,但其发射波谱较 PI 窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是 PI 的理想替代品,可与 Annexin V- APC 联合使用。本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。
【技术参数】
实验类型:细胞凋亡检测
检测方法:流式分析,荧光成像
性质说明: 用流式细胞仪检测,激发波长 633nm,最大发射波长 660 nm,Annexin V-APC 的红色荧光建议使用
FL4 通道检测;激发波长 Ex=546 nm;发射波长 Em=647 nm,7-AAD 红色荧光建议使用 FL3 通道检测。
保存条件:2-8℃,保存 12个月,避光
【文献引用】
Lin C, Zhang J, Lu Y,et al. NIT1 suppresses tumour proliferation by activating the TGFβ1-Smad23 signalling pathway in colorectal cancer. Cell Death Dis. 2018.IF=5.638
Zhang ZF, Zhang HR, Zhang QY, et al. High expression of TMEM40 is associated with the malignant behavior and tumorigenesis in bladder cancer. J Transl Med. 2018. IF=3.79
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配 Annexin V 使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g 离心 5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD











