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Anti-PRPF8 Polyclonal Antibody

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      Anti-PRPF8 Polyclonal Antibody

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      上海博湖

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      详见说明书

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    Anti-PRPF8 Polyclonal AntibodyLEFTY2 Protein Human 重组人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 标签)十二烷基硫酸钠(标准品)质量规格:含量测定Sodium dodecyl sulfate
    人肝内胆管上皮细胞 (HIBEC)( 5×105 ) HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 Rattus盐酸米安色林(标准品)质量规格:含量测定Mianserin hydrochloride
    C57BL/6小鼠T细胞瘤细胞;RMA达卡他韦;BMS790052质量规格:>98%,BRDaclatasvir;BMS-7900
    HEC-1-B细胞,子宫内膜腺癌细胞 人鼻咽癌细胞(高分化),CNE1细胞 CL-0257BC-009(人癌细胞)5×106cells/瓶×2达比加群酯Dabigatran etexilate质量规格:>97%
    中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS3利伐沙班Rivaroxaban质量规格:度≥98%
    TNFRSF8 Others Human 人 CD30 / TNFRSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 18-冠-6-(>98.0%(GC))18-Crown 6-Ether质量规格:>98.0
    产品名称:Anti-PRPF8 Polyclonal Antibody
    英文名称: Anti-PRPF8 Polyclonal Antibody

    宿主: Rabbit
    别名: PRP8;RP13;HPRP8;PRPC8;SNRNP220
    应用: WB IHC
    稀释比例: WB 1:500-2000. IHC 1:20-100.
    交叉反应:  Human Mouse
    蛋白分子量: 274kDa
    Gene ID: 10594
    保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
    储存液: Buffer: PBS with 0.03% Proclin300, 50% glycerol, pH7.3.
    纯化方法: Affinity purification
    亚型: IgG
    免疫原: A synthetic peptide of human PRPF8
    性状: 液体
    Public Immunogen Range: A synthetic peptide of human PRPF8
    Subcellular Locations: Nucleus Cytoplasm
    Swiss Prot: Q6P2Q9
    克隆类型:  Polyclonal Antibody
    产品名称 Anti-PRPF8 Polyclonal Antibody
    英文名称 Anti-PRPF8 Polyclonal Antibody
    货号 BH-DB3684
    产品细节图片1
    操作步骤:
    Ⅰ 实体组织蛋白的提取
     1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
    2.  每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
    3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
    4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
    5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
    Ⅱ 培养细胞蛋白提取
    1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
    2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
    3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
    4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
            细胞数量         Lysis Buffer加入量
            107         0.5 mL~1 mL
            5×106         0.2 mL~0.5 mL
    5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
    6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
    7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

    固定液的应用:
    1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
    1.单纯固定液
    (1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
    (2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
    (3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
    2.混合固定液
    (1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
    (3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
    (4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
    (5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效

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