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- Nippon Gene
- 311-07481
- 2025年10月21日
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Bst DNA Polymerase
链置换酶
◆产品说明
本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性，是一款自动从模板双链DNA的氢键解离，然后后合成新DNA链的酶。由于其特性，耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离，即可在恒定温度下合成DNA，且合成不受DNA二级结构的抑制。
特点
● 具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性
● 可在恒定温度下合成DNA
● 适用于合成GC含量高的DNA链
● 合成不受DNA二级结构抑制
应用
● 利用链置换活性的应用（等温基因扩增法等）
Bst DNA Polymerase
| 最佳反应温度 |
60°C～65°C |
| 失活时间*1 |
80°C、5 min |
*1 将酶原液直接热变性时的失活温度
| 来源 |
Geobacillus stearothermophilus |
| 活性 |
8 units/μL |
| 单位定义 |
1 unit指以小牛胸腺DNA为引物/模板，在65°C，30 min的条件下将10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物的酶量。 |
| 储存液成分 |
10 mmol/L Tris-HCl（pH 7.5）, 1 mmol/L DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/L EDTA, 50% Glycerol |
| 酶反应条件 |
随酶附带10×的酶反应专用缓冲液（0.5 mL×1）。如反应总体积为50 μL，添加5 μL的酶反应专用缓冲液 |
◆产品组成
Bst DNA Polymerase（1,600 units）
| 产品组分 |
容量 |
保存 |
| Bst DNA Polymerase（8 units/μL） |
200 μL × 1 |
-20°C |
| 10 × Bst Reaction Buffer（80 mmol/L Mg2+） |
500 μL × 1 |
-20°C |
◆应用实例
实验案例1 LAMP法中的运用
LAMP法 反应条件
|
|
3.0% Agarose 21 TAE凝胶电泳 EtBr染色
M：Gene Ladder Wide 1 1：A 公司Bst DNA Polymerase 2：本公司Bst DNA Polymerase |
| Candidatus Liberibacter asiaticus DNA |
1 × 106 copies |
| FIP* |
40 pmol |
| BIP* |
40 pmol |
| F3 Primer* |
5 pmol |
| B3 Primer* |
5 pmol |
| Loop Primer F* |
20 pmol |
| Loop Primer B* |
20 pmol |
| dNTPs Mixture |
1.4 mM each |
| 10 × Bst Reaction Buffer |
2.5 μL |
| Bst DNA Polymerase |
8 units |
| Total |
25 μL |
反应
| 65°C |
60 min |
*引物序列
FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3'
BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3'
F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3'
B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3'
Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3'
Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'
实验案例2 RCA法评估Bst DNA Polymerase的耐热性与最佳反应温度
RCA法 反应溶液组成
| M13mp18 single strand DNA |
40 ng |
| Universal primer |
50 mM |
| dNTPs Mixture |
1.4 mM each |
| Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C) |
20 mM |
| KCl |
10 mM |
| (NH4)2SO4 |
10 mM |
| MgSO4 |
8 mM |
| Tween 20 |
0.10% |
| Betaine |
0.8 M |
| Bst DNA Polymerase |
4 units |
| Total |
20 μL |
反应条件
| 各个温度下 |
30 min |
结果
条带
M： Gene Ladder Wide 1 (产品编号313-06961)
D： 模板 DNA (M13mp8 single strand, 产品编号319-00841)
引物序列（Universal Primer）
5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'
电泳条件
0.7% Agarose S / TAE凝胶电泳
EtBr染色
使用不含SDS的Loading Buffer
备注
本实验为比较两种Bst DNA Polymerase，使用相同的反应液组成进行反应。在RCA法中使用各种酶配套的专用缓冲液时，须进行预实验探究反应体系。
◆相关信息
备注
● 本产品为实验研究用试剂。不可作为医药品使用。
● 检测Candidatus Liberibacter asiaticus的LAMP引物组合是国立研究开发法人 农业、食品产业技术综合研究机构 九州冲绳农业研究中心灵活运用先进技术，在农林水产研究高度化事业“抑制顽固性疾病柑橘绿化病传播的技术开发”中开发的产品。
License
● LAMP（Loop-mediated Isothermal Amplification）法由荣研化学株式会社持有专利权。
◆产品列表
| 产品编号 |
产品名称 |
包装 |
| Bst DNA Polymerase |
1600 units |
◆相关产品
| 产品编号 |
产品名称 |
包装 |
| Csa DNA Polymerase |
1600 units |
|
| 96-7 DNA Polymerase |
1600 units |
|
| dNTPs Mixture（25 mM each） |
400 μL |
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文献和实验Bst-catalyzed radiolabeled DNA sequencing
Bst DNA polymerase-catalyzed radiolabeled two-step sequencing reactions are modified from those presented earlier by altering the absolute amounts and the relative deoxy/dideoxynucleotide ratios in the termination mixes
nuclear RNA promoter-based parent vector using a single-stranded inverted repeat DNA and Bst DNA polymerase. The shRNA expression plasmids constructed by this method were confirmed to promote efficient RNA interference knockdown in silkworm cell lines
PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应，对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么，对于 PCR 反应的核心成份，DNA 聚合酶，你选对了吗？ 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等，常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分，高保真聚合
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
