Anti-CCNE2 Polyclonal Antibody

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      BH-DB2860 35

    • 英文名

      Anti-CCNE2 Polyclonal Antibody

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      上海博湖

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      详见说明书

    • 规格

    产品名称:Anti-CCNE2 Polyclonal Antibody
    英文名称: Anti-CCNE2 Polyclonal Antibody

    宿主: Rabbit
    别名: CYCE2
    应用: WB IF
    产品名称 Anti-CCNE2 Polyclonal Antibody
    英文名称 Anti-CCNE2 Polyclonal Antibody
    货号 BH-DB2860
    稀释比例: WB 1:500-2000. IF 1:50-200.
    交叉反应:  Human
    蛋白分子量: 41kDa/47kDa
    Gene ID: 9134
    保存: Store at -20°C. Avoid freeze / thaw cycles.
    储存液: Buffer: PBS with 0.02% sodium azide, 50% glycerol, pH7.3.
    纯化方法: Affinity purification
    亚型: IgG
    免疫原: Recombinant protein of human CCNE2
    性状: 液体
    Public Immunogen Range: Recombinant protein of human CCNE2
    Subcellular Locations: Nucleus
    Swiss Prot: O96020
    克隆类型:  Polyclonal Antibody
    Anti-CCNE2 Polyclonal Antibody
    操作步骤:
    Ⅰ 实体组织蛋白的提取
     1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
    2.  每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
    3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
    4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
    5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
    Ⅱ 培养细胞蛋白提取
    1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
    2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
    3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
    4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
            细胞数量         Lysis Buffer加入量
            107         0.5 mL~1 mL
            5×106         0.2 mL~0.5 mL
    5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
    6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
    7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
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    ABTSsubstrateliquid2,2′联双(3乙基本并噻唑啉6磺酸)盐底物25克AR,60%

    10563Fmoc链接剂4[(2,4Dimetxoxypxenyl)(Fmocamino)metxyl]pxenoxyacetic acid
    D色酸盐酸盐,英文名或英文缩写:DTryptophan metxyl ester xy7nochloride,级别:BR,98%,规格:5克
    1,2,4三基本 1,2,4Trimqthylbqnzqnq 636
    分子筛3A型 MOLqCULcR SIqVqS 308
    四本硼钾100毫克保存:20℃
    10甲基3硝基本2metxyl3nitnobenzoic acid
    偏酸钠shēng huà shì jì容量:0.25毫升
    2,5二 2,5Dibromopyridinq 6
    正shēng huà shì jì容量:100克
    苏丹Ⅲ500毫克
    61,4二代丁烷 ≥99%1,4Diiodobutane
    5核苷酸酶1克
    四基化铵 Tetrapropylammonium chloride 58104 1G 通用试剂
    盐酸匹罗卡品 Pilocarpine Hydrochloride (≥98%) 5 1G 通用试剂
    大鼠肝细胞;BRL 3A托伐普坦 Tolvaptan质量规格:度≥99.0%,BR,可用于细胞培养
    GDF15 Others Human 人 GDF-15 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺噻唑Sulfathiazole质量规格:>99%,BR
    小鼠胚胎成纤维细胞MEF磺胺噻唑(标准品)Sulfathiazole质量规格:含量测定
    MARK3 Others Human 人 MARK3 / CTAK1 / EMK-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 环苯扎林盐酸盐Cyclobenzaprine HCl质量规格:>99%,BR
    人胚肝二倍体细胞;CCC-HEL-1盐酸美托咪定Medetomidine HCl质量规格:≥99.0%,BR
    Anti-CCNE2 Polyclonal AntibodyHCT116/L 人结肠癌耐奥沙利铂耐药株alpha-熊果苷(标准品)alpha-Arbutin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
    SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) L-羟基脯氨酸(标准品)L-Hydroxyproline质量规格:HPLC≥98%,标准品
    人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0L-羟基脯氨酸L-Hydroxyproline质量规格:>99%,BR
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    人脐带单核细胞完全培养基 100mLFmoc-D-4-苯丙氨酸Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH质量规格:HPLC>98%
    固定液的应用:
    1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
    1.单纯固定液
    (1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
    (2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
    (3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
    2.混合固定液
    (1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
    (3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
    (4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
    (5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效

     

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