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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
39
- 英文名：
Goat Anti-Rabbit IgG/Alexa Fluor 594
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
| 产品名称 | Alexa Fluor 594标记的山羊抗兔IgG规格 |
| 英文名称 | Goat Anti-Rabbit IgG/Alexa Fluor 594 |
| 货号 | YS-D5047 |
英文名称: Goat Anti-Rabbit IgG/Alexa Fluor 594
应用: IF=1:100-1000;not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
浓度: 2mg/1ml
纯化方法: affinity purified by Protein G
使用方法：
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
下列是Alexa Fluor 594标记的山羊抗兔IgG规格的相关产品：
Homo sapiens (Human)钙结合蛋白S100A14 ELISA试剂盒
神经生长因子-3（抗原）WNT2 ELISA Kit
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文献和实验保持优异的水溶性，为该波段最亮的橙色荧光染料。例如：同等的标记程度下，CF543 标记的羊抗鼠IgG抗体的亮度高于用Alexa Fluor 546 标记的2~10倍。CF 555、AlexaFluor 555、Tetramethylrhodamine(TAMRA) 等匹配Cy3滤光片的橙色荧光染料；红色（568-594nm处激发）CF 568、Alexa Fluor® 568,ATTO 565, Rhodamine Red等568nm处红色荧光染料；CF 568染料耐光性最好；高效水溶
543 标记的羊抗鼠IgG抗体的亮度高于用Alexa Fluor 546 标记的2~10倍。CF 555、Alexa Fluor 555、Tetramethylrhodamine (TAMRA) 等匹配Cy3滤光片的橙色荧光染料；4、红色（568-594nm处激发）CF 568、Alexa Fluor® 568, ATTO 565, Rhodamine Red等568nm处红色荧光染料；CF 568染料耐光性最好；高效水溶性；比Alexa Fluor 568 标记的抗体亮度更亮；CF 594
，耐光，水溶性好，确保了CF 543染料与抗体的耦联物保持优异的水溶性，为该波段最亮的橙色荧光染料。例如：同等的标记程度下，CF 543标记的羊抗鼠IgG抗体的亮度高于用Alexa Fluor 546 标记的2~10倍。 CF 555、Alexa Fluor 555、Tetramethylrhodamine (TAMRA) 等匹配Cy3滤光片的橙色荧光染料。 4、红色（568-594nm处激发） CF 568、Alexa Fluor® 568, ATTO 565
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