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10
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天津本生生物
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现货状态
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详询说明书
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500个/包;10包/箱
2.0ml;可立;带半透明标准盖琥珀色样品管;白色盖
【货号】STB05-020-1W
【描述】2.0ml;可立;带半透明标准盖琥珀色样品管;白色盖
【应用领域】IVD诊断试剂/标准品/酶保存管
【包装】500个/包;10包/箱
注:产品仅用于科研实验,不用于临床!
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文献和实验(1)将200mg组织在冰浴条件下用消毒剪刀充分剪碎,加4ml 1×RSB缓冲液(10mmol/L Tris, pH7.4;10mmol/l NaCl;25mmol/L EDTA,pH7.4)放入10ml带盖的塑料管中。 (2)加SDS至浓度为1%(可加0.4ml10%SDS),混匀。由于DNA从核中释放出来,样品变得粘稠。 (3)加10mg/ml蛋白酶k 44μl,终浓度为100μl/ml,37℃保温1~3d,直到组织完全解体。中间可振动样品管几次。加0.4ml
步骤在暗室进行:加3mL DAN试剂,混匀,置沸水浴中煮5min,取出立即冷却,加3mL环己烷,振摇4min,将全部溶液移入分液漏斗,待分层后弃去水层,环己烷层转入带盖试管中,小心勿使环己烷中混入水滴,于激发光波长376nm,发射光波长520 nm处测定苤硒脑的荧光强度。 5.3 硒标准曲线绘制:准确吸取硒标准使用液0、0.2、1.0,2.0及4.0mL,加水至5mL,按样品测定步骤同时进行。硒含量在0.5μg以下时荧光强度与硒含量呈线性关系,在常规测定样品时,每次需做试剂空白与样品含硒量相近
量范围的 DNA 分子量标准作为对照; (6)盖上电泳槽盖,调节电压 100 V,电泳 40 min 左右; (7)电泳完毕后将凝胶置于紫外透射检测仪上观察结果,用凝胶成像系统照相保存。 注意事项 1. 提取时要做到超净台内操作、操作带一次性手套、EP管及Tip头都要用0.1%处理(0.1% DEPC浸泡过夜后,高压蒸气灭菌)、小心、细致、晃动及每次移液要轻。这样做的唯一目的就是两个,一是小心RNAse的污染降解
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