冻存程序降温盒；适用于5.0ml冻存管

细胞冻存的程序降温盒的使用注意事项

醇一般是250ml，低于刻度了要加上，理论上是5次以后更换异丙醇，但是异丙醇对环境有害，我们可以多用几次，只是少了的时候要加满。还有冻存液里面的DMSO 对细胞有毒性，尤其是室温的时候，所以冻存盒和冻存液先放4°，等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里，还放回4°，等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。 程序降温盒这个梯度降温可大大提高细胞冻存的存活率，由于程序降温盒内存在100%浓度的异丙醇和泡沫内衬，因此程序降温盒也可以用于细胞复苏。

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浓度。（不要重新洗细胞）。 3. 盖子不紧： 冻存管的盖子一定要拧紧，否则复苏水浴时会渗水，造成污染。 解决： 选择原配的管子和盖子（不同牌子 / 型号的颜色会有差别）。 4. 单薄的冻存盒： 放在－80 度的冻存盒，壁太薄，细胞在被迅速降温。 解决： 选择厚壁泡沫塑料盒，或塞入大量干棉花。（冻存的原则：缓降！） 5. -80 度太久： 放在－80 度冰箱的时间超过半年。（冰箱的温度难以恒定：开门 / 关门，电压不稳等） 解决： 尽快转入液氮。 6. 液氮不足： 液面不能漫过所有细胞。 解决： 定期测量

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至最终浓度为 10%。加入 DMSO 后迅速混匀，按每 1ml 的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于 1X10个细胞冻存。 3、将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，至少 2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 六、注意事项 1、收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。 2、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌