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- 上海研生
- YS-D4352
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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
41
- 英文名：
Human albumin/HRP
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
产品名称：人白蛋白-HRP图片
别名: 辣根过氧化物酶标记人白蛋白
英文名称: Human albumin/HRP
储存条件: -20℃
单位: 瓶
其它:
备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
参数规格：
| 产品名称 | 人白蛋白-HRP图片 |
| 英文名称 | Human albumin/HRP |
| 货号 | YS-D4352 |
注意事项：
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
下列是人白蛋白-HRP图片的相关产品：
Oryctolagus cuniculus (Rabbit)乳糖胆盐发酵培养基
2-酰基-4-氯噻吩GLP1R ELISA Kit
Homo sapiens (Human)双料乳糖胆盐发酵管
1,3-二溴金刚烷GLP-1 ELISA Kit
Mus musculus (Mouse)无菌单料乳糖胆盐发酵管
3-氯-4-醛GC ELISA Kit
Rattus norvegicus (Rat)伊红美蓝琼脂EMB
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Canis familiaris; Canine (Do
人白蛋白-HRP图片细胞生长抑制基因1蛋白抗体TPP1
状腺素T4抗体T4/L-Thyroxine
转录因子CP2抗体TFCP2C
基双加氧酶TET2抗体TET2
细胞粘合素抗体(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)抗体Tenascin C (C terminal)
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文献和实验所谓工欲善其事必先利其器，做实验也是一样的道理。做免疫组织化学染色，抗体信号弱，再怎么重复也达不到好的效果，不如试试 TSA 酪胺信号放大技术。该技术是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法，可有效放大信号 100-800 倍。该技术可与高性能染料 Alexa Fluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。上海臻和生物科技有限公司基于 TSA 酪胺信号放大技术开发了一系列自主品牌 EU-BIO 试剂盒，包括不同荧光标记、针对不同一抗种属来源，以及双
，有可能去掉杂带； ③ 电转后采用脱脂牛奶或 BSA 封闭，适当加长封闭时间可改善； ④ 洗膜的时候会将膜上的非目的蛋白洗脱，因此多次洗脱可以降低杂带干扰。 4、胶片空白 ① 二抗的 HRP 用于信号放大和简化目标蛋白检测，其活性太强，会将底物消耗光，建议适当降低二抗浓度； ② ECM 底物中 H2O2 不稳定，失活也会导致胶片空白，重新更换 ECM； ③ ECL 底物没覆盖到相应位置，可重新洗膜厚后再次曝光； ④ 抗体不匹配会导致无法精准捕捉，保证使用的抗体正确，且在有效期内。 先前
Solution平衡, 这些按照规定操作即可! 没有太多的细节,只是注意两点,一是期间结合膜的表面一定不能干燥!!!二是Streptavidin-HRP不能加在膜上,而是加在液体中混韵后在将膜放在液体中孵浴. 8. 化学发光图像显示 两种方法:化学发光数字成像与检测和感光胶片冲印成像。操作基本和Western 试验操作相当, 只是这个膜是一次性的,不能重复使用, 一定保存好图片!!! 由于跑得是非变性凝胶,蛋白保持天然构想和活性,所以代条很可能是一块一块的而不像WB那样很规整的一条细线
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