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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 英文名:
Rabbit anti-MG IgG/AP
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
瓶
1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
参数规格:
| 产品名称 | 碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗长爪沙鼠IgG图片 |
| 英文名称 | Rabbit anti-MG IgG/AP |
| 货号 | YS-D10640 |
英文名称: Rabbit anti-MG IgG/AP
应用: WB=1:1000-10000;ELISA=1:1000-10000;IHC-P=1:100-1000;IHC-F=1:100-1000;not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
浓度: 1mg/1ml
蛋白分子量: 150kDa
纯化方法: affinity purified by Protein A
使用方法:
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
下列是碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗长爪沙鼠IgG图片的相关产品:
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48TOPGL(MouseOsteoprotegerinLigand)ELISAKIT小鼠骨保护素配体100597-200501
48TLF/LTF(MouseLactoferrin)ELISAKIT小鼠铁传递蛋白/铁蛋白100598-200601
48TEMAIgA(Mouseanti-EndomysialAntibodyIgA)ELISAKIT小鼠抗肌内膜抗体IgA100599-200502
4also be served over HTTPS.Bullatine B 兔抗人、大、小鼠磷化周期素B1IgG
大脑皮层神经元GLP1R peptide环指蛋白60
Bullatine G 兔抗人、大、小鼠磷化周期素B1IgG
星形胶质细胞--中脑Gentamicin/BSA肌球蛋白轻链7
4-Isopropyltoluene 磷化周期素B1IgG
海马神经元细胞GSTTag心脏肌球蛋白结合蛋白
6-O-Benzoylphlorigidoside B抗体
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4'-O-trans-p-Coumaroylalso be served over HTTPS.
碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗长爪沙鼠IgG图片非洲绿猴SV40转化的肾细胞苜蓿中华根瘤Sinorhizobiummeliloti
Cortexacanthopanacis五加皮PCR鉴定试剂盒
五肽胃泌质量>95%,BRPentagastrin
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Fructusevodiae吴茱萸PCR鉴定试剂盒
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文献和实验,非常适合做类似双标的免疫实验。 【二抗的耦联标记】 一般来讲,耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC、 Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight等)、生物素、金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗;而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中
实验。 【二抗的耦联标记】 一般来讲,耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC、 Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight等)、生物素、金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗;而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记
过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC、 Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight等)、生物素、金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗;而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用Biotin/Avidin检测
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