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52
- 英文名:
Human Gamma globulins
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详见说明书
- 供应商:
上海研生
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详见说明书
- 规格:
瓶
| 产品名称 | 人丙种球蛋白 价格 |
| 英文名称 | Human Gamma globulins |
| 货号 | YS-D4322 |
英文名称: Human Gamma globulins
储存条件: -20℃
纯度: 69% protein。
单位: 瓶
其它:
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
使用方法:
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项:
1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
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1
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文献和实验血清球蛋白在中性 pH的电泳中移动较慢于α及β球蛋白的另一种球蛋白。由于大多数免疫球蛋白都被包括在这一范围内,故γ球蛋白这一名称被用作抗体的代名词;但并非把全部抗体都包括在内。抗体中 IgG占大部分,此外还包括有 IgA。在生物体的免疫反应中起主要作用。在细菌感染等情况下γ球蛋白增多。
血清单克隆丙种球蛋白 【参考范围】血清蛋白区带电泳:在γ区蛋白峰的高与宽之比应>2:1;在β区和α2区高与宽之比应>1:1.免疫电泳:无明显沉淀弧。 血清Ig定量:同血清Ig. 【影响因素】区带电泳和免疫电泳影响因素较多,蛋白质性质、缓冲液的pH、载体选择、电压大小、电流强度、电泳时间、免疫电泳抗体效价及纯度、选择兔抗血清、染色时间等均与检测结果有密切关系。 1.标本必须新鲜、防止溶血。区带电泳一般不能完全确定M蛋白的Ig类别,某些情况下还可出现假阳
先天性的或获得性的(白血病等)一部分或全部类型的血清免疫球蛋白浓度低于正常人的状态。在很多情况下也将无丙种球蛋白血症称为本症。先天性低丙种球蛋白血症可因缺少 IgG、 IgA、 IgM中的一种、两种或全部型别的球蛋白而有多种病型。这就暗示了免疫球蛋白的合成是由不同遗传基因支配的。
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