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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 英文名:
Pig IgG
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
瓶
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
产品名称:猪IgG干粉说明书
英文名称: Pig IgG
储存条件: -20℃
纯度: 每15mg干粉含10mg猪IgG。
单位: 支
其它:
免疫球蛋白(IgG)广泛地应用于免疫学及分子生物学中各个分支学科的研究领域,它即可作为大分子球蛋白用于生物化学的研究,也可以作为抗原用于免疫学和临床医学之中。我们采用分段饱和硫酸铵盐析与弱碱性阴离子交换层析的方法,纯化各种人与动物血清(IgG冷冻干燥或液体)。每种产品可达到免疫电泳、聚凝胶电泳纯。
应用范围:
1.可作参考蛋白,分子量15.5万;
2.参考抗原,如药物试验中观察免疫效果,用IgG作参考抗原;
3.作抗原使用:
(1)免疫动物
(2)测定对应抗体
(3)吸收杂抗体的抗原,当制成抗IgA、抗IgM,如果与IgG有交叉反应时,用IgG作抗原吸收去杂抗体。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
参数规格:
| 产品名称 | 猪IgG干粉说明书 |
| 英文名称 | Pig IgG |
| 货号 | YS-D4285 |
注意事项:
1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
下列是猪IgG干粉说明书的相关产品:
线粒体促凋亡蛋白抗原
酰辅酶A转运蛋白1抗原
磷酸钠协同转运蛋白抗原
运动神经元生存蛋白1抗原
磷酸化Smad2抗原
Smad4抗原
Smad 7(多肽)
磷酸化SMAD(p-Ser425)抗原
突触相关膜蛋白25抗原
Snail蛋白抗原
猪IgG干粉说明书晚期糖基化终末产物特异性受体抗体RAGE
环指蛋白12抗体RNF12
环指蛋白113B抗体RNF113B
环指蛋白165抗体RNF165
环指蛋白186抗体RNF186
凋亡相关蛋白1抗体RYBP
磷酸化S6核糖体蛋白抗体 (Ser240/244)Phospho-RPS6 (Ser240 + Ser244)
磷酸化Runx3抗体phospho-RUNX3(Ser338)
RAS相关蛋白癌基因Rab14抗体RAB-14
磷酸化视网膜母细胞瘤样蛋白p107抗体phospho-p107(Ser975)
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文献和实验7.5)” 。而且我在配制培养基是,也试用过1MNaOH调PH,但用量很大,所以就以文献介绍的10MNaOH调PH,而按DMEM的说明书碳酸氢钠的添加量应该是3.7g/L。2.另外我配制培养基时血清加入的方式也是不恰当的。 “我在配制培养基时没有考虑到血清与培养基是等渗的问题,5%的血清体积是算在需要溶解DMEM干粉所需液体之内的(如取水950mL溶解1包干粉,再加50mL血清)”。我已经这样配制的培养基如果对细胞培养影响很大,现存的500mL培养基是否还可补救,应该如何补救。3.谷氨酰氨添加过量对细胞有没有
我们知道,PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉,这使得运输非常便捷,只要常温即可。而且,细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定,在-20℃或-80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解,然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。溶解步骤非常关键,因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活,这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。 那么,应该如何进行正确的溶解呢? 下面我们以Recombinant Human IL-4 (重组人IL-4,产品编号:200-04)的说明书为例
)的说明书为例,对细胞因子或蛋白的溶解方法进行详细的阐述。 拿到重组人IL-4的说明书后,您会发现有一段关于Reconstitution(重悬)的叙述,这段内容含有溶解相关的所有信息。 1. Centrifuge the vial prior to opening 第 1 步:开盖前离心试剂管 PeproTech的细胞因子或蛋白冻干粉装盛在塑料管中,为无菌包装。冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而漂散并粘贴于管壁或管盖上,所以在打开塑料瓶盖前,需将冻干粉通过离心收集到管底
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