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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
A DNA sequence encoding the canine IL25 (XP_005623293.1) (Leu17-Ala169) was expressed with the Fc region of human IgG1 at the N-terminus.
- 亚型:
见说明书
- 形态:
液体
- 保存条件:
4℃
- 克隆性:
无
- 标记物:
见说明书
- 适应物种:
Canine
- 保质期:
12个月
- 抗原来源:
见说明书
- 目录编号:
70090-D01HL
- 级别:
免疫学
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 宿主:
HEK293 Cells
- 应用范围:
WB
- 浓度:
见说明书
- 靶点:
IL25
- 抗体英文名:
Canine IL-25 CHO Cell Lysate (WB positive control)
- 抗体名:
Canine IL-25 CHO Cell Lysate (WB positive control)
- 规格:
300 µg
反应种属:Canine
裂解液靶点:IL25
裂解液应用:WB
裂解液保存条件:Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
裂解液产品描述:HEK293 Cell Canine IL-25 transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
裂解液表达宿主:HEK293 Cells
裂解液制备方法:Cell lysate was prepared by homogenization in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
裂解液Buffer:Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
裂解液质控信息:12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
裂解液使用建议:1. Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2. Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min. 3. Store the lyophilized cell lysate at 4℃. After re-dissolution, recommend to aliquot it into smaller quantities and store at -80℃.
裂解液稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
裂解液使用说明:Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested.
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文献和实验D 的抗体,选择抗体时可优先挑选经过验证的,如有组织染色的结果更佳,像是 GeneTex 的兔单抗 GTX635362。GTX635362 RAS(G12D 突变体)抗体通过使用多种细胞及正常与癌组织对照进行正交策略验证;在人胰腺癌细胞系和 PDAC 小鼠模型的 RAS G12D 突变蛋白表现出高度的敏感性和特异性。左图为印迹(WB)和右图为免疫组化(IHC-P)。5. 蛋白过表达利用在细胞中过表达目标蛋白,并收取细胞裂解液后进行 WB 分析,理论上蛋白量增多,抗体辨识后的信号也会增强,因此可确认抗体
裂解物。阳性对照是含有已知的或标准量的待测抗原样品,来源于细菌或杆状病毒超常表达系统或已鉴定的细胞系。它可提示免疫印迹是否成功,并能对抗原的相对分子量进行精确比较;如果阳性对照中抗原的量是已知的,可粗略估计出待测样品中抗原的含量。阴性对照给出的是非免疫抗体与待测样品的背景读数。若有可能,再设置一个不含待测抗原的细胞裂解液对照(例如来源于含无效基因的细胞)更利于解释结果。若比较多个不同细胞样品的抗原含量,则需考虑样品标化问题。例如,若进行有意义的比较,需校正样品的总蛋白量,或校正细胞数。测定样品中蛋白质浓度
问:各位大虾小弟我最近一直在瞬转COS细胞分泌表达上清一直没有表达也浓缩过再做ELISA WB 都没有啊时间挺长了实在等不及了就想稳定转染cho-k1细胞系通过MSX来筛选加压25UM的MSX 结果还不到两个星期CHO全死了不知道怎么回事如果有表达的话应该是分泌表达的怎么我总是做不出来呢很是一个郁闷阿 质粒纯度和浓度都应该没问题希望做过这方面试验的高人指点一下到底哪里我还没有考虑到阿谢谢了答:提三点建议:1,用MSX筛选之前最好做预实验,摸出其最小有效浓度,然后用这个浓度去筛选阳性
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