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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
28
- 英文名：
Goat Anti-rabbit IgG/HRP antibody
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
1、本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来，造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心，离心后直接上样电泳;若想测定浓度，可入加少量SDS(1%)，煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒，请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后离心取上清用于后续实验。
参数规格：
| 产品名称 | 羊抗兔IgG-HRP说明书 |
| 英文名称 | Goat Anti-rabbit IgG/HRP antibody |
| 货号 | YS-D4257 |
英文名称: Goat Anti-rabbit IgG/HRP antibody
中文名称: 辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG
应用: WB=1:200-5000 ELISA=1:500-5000 IHC-P=1:20-500
保存: -20℃
纯化方法: affinity purified by Protein A
亚型: IgG
克隆类型: polyclonal
其它:
过氧化物酶（HRP）标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。本公司制备的各种HRP标记抗体，均根据改良的过钠氧化法标记而成。本产品每0.1ml液体含有HRP约200ug/支，IgG约含400ug/支。
工作效价：ELISA法：1：500～5000，用TMB作底物（OD450nm）P/N＝2.5～3.0为阳性。免疫印迹：1：200～5000。免疫组化：1：20～500。
酶标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。目前较为常用的是将辣根过氧化物酶(HRP)，经过钠氧化而标记在抗体IgG分子上，而制成HRP—抗体结合物。公司向用户提供的各类酶标物，均根据本公司建立的改良过钠氧化法标记而成。每种成品已加入一定浓度的BSA作为稳定剂。产品的工作浓度根据方法不同而别，用前最好-20℃冻存，避免反复化冻。
应用范围：
抗原决定族的抗原性分析鉴定，各种抗原、抗体的定量、定性及定位分析测定等。
工作中易产生的问题：
1.包被抗体或抗原不适，易产生阳性值较小，或产生变异，即跳管现象。
2.用抗血清不纯化，或纯化程度太低的抗体包被，则阳性值较小，或没有阳性梯度。
3.封闭不好或标记物过浓可产生对照较高。
储存条件
Storeat–20oCforoneyear.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Thelyophilizedantibodyisstableatroomtemperatureforatleastonemonthandforgreaterthanayearwhenkeptat-20oC.Whenreconstitutedinsteriledistilledwaterordiluentsupplied,theantibodyisstableforatleasttwoweeksat2-4°C.
备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
使用方法：
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014)，使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液，混匀，充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成50~100万细胞/管，然后再裂解。具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(3) 充分裂解后，10000~14000 rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片；
(2) 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM；
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量，具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
(5) 充分裂解后，10000~14000rpm离心3~5 min，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
下列是羊抗兔IgG-HRP说明书的相关产品：
KT3 tag标签抗原
VSV-G tag标签抗原
HLA-DR抗原
人类白细胞抗原E
高迁移率族蛋白A1抗原
高迁移率族蛋白A2抗原
血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原
血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原
血红素氧合酶-2抗原
异染色质蛋白1(磷酸化多肽)
羊抗兔IgG-HRP说明书β1,3-N-乙酰糖基转移酶抗体Radical Fringe
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亚单位1抗体RAB3GAP1
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亚单位2抗体RAB3GAP2
维甲酸诱导蛋白1抗体RAI1
环指蛋白13抗体RNF13
环指蛋白15抗体RNF15
金属蛋白酶抑制因子RECK抗体RECK
视黄酸受体应答蛋白3抗体Rarres3
视黄酸受体应答蛋白1抗体RARRES1
环指蛋白128抗体RNF128
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文献和实验我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
第1节- 试剂1.1涂层缓冲液PBS（137 mM氯化钠，2.7 mM的氯化钾，8.1 mM的磷酸氢二钠，1.5 mM磷酸二氢钾）1.2封闭液5％脱脂乳于PBST中（0.05％Tween-20）1.3稀释剂2％脱脂乳于PBST中（0.05％Tween-20）1.4柠檬酸缓冲液3.65克柠檬酸，4.76克磷酸氢二钠，溶解于500毫升双蒸水1.5兔抗GST抗体兔抗GST抗体1.6 HRP结合山羊抗兔IgG（H + L）山羊抗兔IgG（H + L），結合过氧化物酶第2节- 分析方法注：以下方法是一个
一、材料和方法1．试剂及耗材蛋白抽提试剂（改进型RIPA配方）BCA蛋白定量试剂盒5×还原样品缓冲液10×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液考马斯亮蓝染色液10×TBST pH8.0湿转缓冲液PVDF膜，0.22um孔径丽春红染色液PMSF蛋白酶抑制剂封闭液ECL发光液山羊抗兔IgG（H+L），HRP兔抗山羊IgG（H+L），HRPβ-actin 鼠单抗2．实验仪器Fresco低温冷冻离心机MultiSkan3酶标仪电泳槽湿转电泳槽电泳仪水平脱色摇床 二、 实验方法及结果3.1细胞
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