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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
39
- 英文名:
Goat anti-Rabbit IgG
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
储存条件: -20°C
- 规格:
瓶
产品参数:
| 产品名称 | 羊抗兔IgG(免疫血清) |
| 英文名称 | Goat anti-Rabbit IgG |
| 货号 | BH-DB1184 |
英文名称: Goat anti-Rabbit IgG
保存: -20°C
性状: 液体
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
注意事项:
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
操作步骤:
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
温馨提示:
工作液与浓缩液选择的技巧,以及各自的优势。
1,工作液的优势:工作液操作方便,降低实验操作步骤,对于要求无菌的实验,降低染菌风险。
2,浓缩液的优势:浓缩液成本相对较低,实验范围更广,对于不要求无菌的实验,可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高,保存更加稳定。
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文献和实验产生。例如,特异性抗体和抗酶抗体均由兔产生,再用羊抗兔IgG作为桥抗将两者连接起来。 PAP法的基本原理与酶桥法相似,均是利用桥抗将酶连接在第一抗体结合的部位,所不同的是,先将酶(过氧化物酶)和抗酶(过氧化物酶)抗体(PAP)制成复合物,以代替酶桥法中的抗酶抗体和随后结合的酶,将两步合并为一步。这一重要的改进,不仅简化了操作步骤,而且大大提高了敏感性。PAP法的不足之处是反应步骤多,需时长,在实际操作中,会带来非特异性放大效应。亲和免疫组织化学结合了免疫酶组织化学在待检抗原部位形成有色沉淀和亲和组织
第1节- 试剂1.1涂层缓冲液PBS(137 mM氯化钠,2.7 mM的氯化钾,8.1 mM的磷酸氢二钠,1.5 mM磷酸二氢钾)1.2封闭液5%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.3稀释剂2%脱脂乳于PBST中(0.05%Tween-20)1.4柠檬酸缓冲液3.65克柠檬酸,4.76克磷酸氢二钠,溶解于500毫升双蒸水1.5兔抗GST抗体兔抗GST抗体1.6 HRP结合山羊抗兔IgG(H + L)山羊抗兔IgG(H + L),結合过氧化物酶第2节- 分析方法注:以下方法是一个
间接IM―PCR (以神经肽Y的检测为例) 【试剂与配制】 (1)TBS:20mmol/L Tris-HCl(pH7.4),150mmoI/L NaCL (2)封闭液:1.5% BSA (用TBS配制) (3)抗神经肽Y单抗 (4)兔抗神经肽Y抗体 (5)生物素化羊抗兔IgG (6)亲合素 (7)DNA指示分子(生物素―AdAT) (8)PCR反应液:5×PCR缓冲液10μl,dNTP 4μl,引物4μl,EP-DNA聚合酶0.5μl,蒸馏水31.5μl
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