油红O染色液（细胞涂片专用）/ Oil Red O Stai

油红O染色液（细胞涂片专用）/ Oil Red O Staining Solution
产品说明：
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(如乙醇、等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral
fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑 B、油红 O 法等。传统方法采用苏丹染料，最近发现偶氮染料油红 O 更适合脂肪的染色。油红 O 是很强的脂溶剂和染脂剂，较易与甘油三脂结合呈小脂滴状，与磷脂结合力稍差，其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在细胞内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。


油红O染色液简称 ORO 染色液，可显示最小的脂滴，可优先为脂类从溶剂中吸附染料。标本不采用含有乙醇的固定液，如需要固定可采用 10%福尔马林。脂肪阳性染色结果呈橘黄至红色，但具体颜色因脂质浓度而定。


本品经过改良配方，不使用易挥发和有毒的异丙醇来配制，且不易产生沉淀。该方法操作简便 , 染色结果鲜艳 , 染液可反复使用。

 

操作步骤：
一、培养细胞
1、 移除细胞培养基，用PBS洗两次，加ORO Fixative固定液固定20-30min。
2、 弃去固定液，用蒸馏水洗2次。
3、 加入 50%乙醇浸洗5min。
4、 弃去50%乙醇后加入新配制好的ORO Stain，浸染10-20min。
5、 弃去染色液，水洗2-5次，直到无多余染液。
6、 加入Mayer苏木素染色液，复染核1-2min。弃去染液后水洗2-5次。
7、 入ORO Buffer 1min，弃去。
8、 加入蒸馏水覆盖细胞并在显微镜下观察。


二、细胞涂片
1、 制备新鲜骨髓、血液涂片，入ORO Fixative固定10～15min。
2、 取出涂片，放于流通的空气中10～15min。
3、 入新配制好的ORO Stain，浸染15min。
4、 入50%乙醇漂洗20～30s，流水冲洗，入蒸馏水稍微清洗。
5、 入Mayer苏木素染色液，复染核1-2min。
6、 入ORO Buffer 1min。
 
注意事项:
1、封固显示脂肪的切片时 , 切片不宜太干 , 否则易产生气泡。发现有气泡 , 不能压盖玻片驱赶 , 因为这样会使脂滴移位。若有气泡可用温水浸掉盖玻片 ,而后再封固。
2、染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相。
3、苏木素染色液复染时间不能过长。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。