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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 库存:
50
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
1年
- 保存条件:
常温
- 规格:
250mL;500mL
注意事项:
1. 膜再生液实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下将抗体洗脱下来,实际操作中,膜类型、抗体类型、浓度及抗原特性都影响洗脱难易度。
2. 适用于 ECL 和类似的化学发光试剂进行的 Western 检测。不适用于非化学发光试剂进行的 Western检测,例如 DAB,NBT/BCIP。
3. 用 ECL 显色后,再生液洗脱几分钟后,可再次加入 ECL 显色液显影,如胶片上显示条带,表明抗体未除净,须进一步在再生液中浸泡,至胶片上无显色。
4. 使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用 BSA 封闭的膜更容易再生。
5. 尽量避免让膜干燥。
在遇到一抗二抗去除效果欠佳时,可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液,以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。
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文献和实验1) After ECL development, wash membrane once for 10min with PBST. 2) Incubate the membrane in stripping buffer (see below) in a heat-sealed plastic bag for 30min at 50oC with occasional mixing. For low-abundance antigens, the strip
Stripping for reprobing western blots
for blocking stage. 2. Harsh stripping Prepare buffer and strip membranes under a fumehood. 3. Warm the buffer to 50°C. 4. Add the buffer to a small plastic box which has a tight lid. Use a volume that will cover the membrane.
Put the membrane in PBS or TBS with 7ul/ml B-mercaptoetanol and 2%SDS for 30' at RT in agitation Wash the membrane for 30' in PBS or TBS. Put the membrane in blocking buffer
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