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31
- 英文名：
5×G250(Protein quantitative analysis)
- 供应商：
上海博湖
- 规格：
瓶
产品名称：5×考马斯亮蓝G- 250(蛋白定量用)
英文名称:5×G250(Protein quantitative analysis)
储存条件:自订购之日起九个月内有效
单位:ml
产品简介：
考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由465nm变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒。
产品参数：
免疫球蛋白：
注意事项：
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
操作步骤 ：
根据使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品： 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
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三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A亚基5抗体 Anti-ABCA5 WB IHC-P
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酰基辅酶A结合结构域蛋白4抗体 Anti-ACBD4 WB IHC-P
α/β水解酶4抗体 Anti-ABHD4 WB IHC-P
磷脂酸磷酸酯酶LPIN1抗体 Anti-Lipin 1 WB IHC-P
G蛋白偶联受体6抗体 Anti-LGR6 WB IHC-P
λ轻链抗体 Anti-Lambda Light Chain WB IHC-P
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五味子酯乙 HPLC≥98% 20mg Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISAKit 人血红蛋白晚期糖基化终末产物(Hb-AGE)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
西贝母碱 HPLC≥98% 20mg Humanheparansulfate,HSELISAKit 人硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
西贝母碱苷 HPLC≥98% 10mg Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPGELISAKit 人硫酸肝素糖蛋白(HSPG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
西伯利亚远志口山酮B HPLC≥98% 20mg HumanHerpessimplexvirus,HSV-Ag1ELISAKit 人单疱疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
西伯利亚远志糖A HPLC≥98% 20mg HumanHerpessimplexvirusⅠaibody,HSVⅠ-AbELISAKit 人单疱疹病毒Ⅰ型抗体(HSVⅠ-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
西伯利亚远志糖A HPLC≥95% 20mg humanherpesvirusesRFLP基因分析试剂盒20
西红花苷 鉴别 20mg HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
西红花苷I HPLC≥98% 20mg Humanhistatin5ELISAKit 人富组蛋白(histatin5)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
西红花苷II HPLC≥98% 20mg HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
西红柿碱 HPLC≥98% 10mg HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit 人缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGE 人血红蛋白晚期糖基化终末产物(Hb-AGE)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 五味子酯乙 HPLC≥98% 20mg
Humanheparansulfate,HS 人硫酸类肝素(HS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 西贝母碱 HPLC≥98% 20mg
Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPG 人硫酸肝素糖蛋白(HSPG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 西贝母碱苷 HPLC≥98% 10mg
HumanHerpessimplexvirus,HSV-Ag1 人单疱疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 西伯利亚远志口山酮B HPLC≥98% 20mg
HumanHerpessimplexvirusⅠaibody,HSVⅠ-Ab 人单疱疹病毒Ⅰ型抗体(HSVⅠ-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 西伯利亚远志糖A HPLC≥98% 20mg
humanherpesvirusesRFLP基因分析试剂盒20 西伯利亚远志糖A HPLC≥95% 20mg
HumanHexokinase,HK 人己糖激酶(HK)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 西红花苷 鉴别 20mg
Humanhistatin5 人富组蛋白(histatin5)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 西红花苷I HPLC≥98% 20mg
HumanICEprotease-activatingfactor,IRAP 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 西红花苷II HPLC≥98% 20mg
HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMA 人缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 西红柿碱 HPLC≥98% 10mg
5×考马斯亮蓝G- 250(蛋白定量用)RatChorionicGonadoophin,CGELISAKit大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒规格：96T/48T 苏G 用于食品分析,HPLC≥97% 100mg
10倍PIPES浓缩缓冲溶液100毫升 盐酸阿米替林 HPLC≥98% 100mg
MouseChorionicGonadoophin,CGELISA试剂盒小鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒规格：96T/48T 去甲替林盐酸盐 HPLC≥98% 20mg
小鼠血管性血友病因子(vWF)ELISA试剂盒 ，英文名： vWF ELISA Kit 苯佐卡因 HPLC≥99% 100mg
兔子内皮抑素(ES)ELISA检测试剂盒rabbitEndostatin,ESELISAKit 96T/48T 飞燕草色素 HPLC≥98% 10mg
犬α-3干扰素(IFN-α3)试剂盒 Canine Ierferon alpha-3,IFN-α3 ELISA kit 矮牵牛色素 HPLC≥98% 5mg
英文名称HumanEpinephrineELISAKit人(Epinephrine)规格：96T/48T 芍药素 HPLC≥98% 10mg
单核细胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20 锦葵色素 HPLC≥98% 10mg
RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA试剂盒大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 环腺苷 HPLC≥98% 20mg
小鼠血管细胞粘附分子1(VCAM1)ELISA试剂盒 ，英文名： VCAM1 ELISA Kit 安息香 HPLC≥99% 100mg
温馨提示：
工作液与浓缩液选择的技巧，以及各自的优势。
1，工作液的优势：工作液操作方便，降低实验操作步骤，对于要求无菌的实验，降低染菌风险。
2，浓缩液的优势：浓缩液成本相对较低，实验范围更广，对于不要求无菌的实验，可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高，保存更加稳定。
英文名称:5×G250(Protein quantitative analysis)
储存条件:自订购之日起九个月内有效
单位:ml
产品简介：
考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由465nm变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒。
产品参数：
| 产品名称 | 5×考马斯亮蓝G- 250(蛋白定量用) |
| 英文名称 | 5×G250(Protein quantitative analysis) |
| 货号 | BH-DB016 |
注意事项：
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
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4、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
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1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
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c)对于组织样品： 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
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文献和实验相关实验
一、目的 学习和掌握考马斯亮蓝G-250 测定蛋白质含量的原理和方法。二、原理 考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250 在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm 波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白
一般R250 染蛋白，G250 一般测蛋白浓度，也可染胶，敏感性更高但较慢脱色较难。 G250常用的蛋白染料，作定性试验用,染色后为蓝绿色;R250较敏感,，做定量实验用,染胶效果较好.染色后为红蓝色 考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）。C45H44O7H3S2Na，MW=824，λmax
一、原理：考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调，在酸性溶液中，其以游离态存在呈棕红色，当它与蛋白质通过疏水作用结合后，变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速，约在2分钟左右的时间内达到平衡，在室温1小时之内是稳定的。在0．01一1.0mg蛋白质／m1范围内，蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制： 100mg的考马斯克蓝G—250溶解于50m1 95％的乙醇中，加入
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5×考马斯亮蓝G- 250(蛋白定量用)
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