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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
PG13 逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞
- 细胞类型:
贴壁生长
- 肿瘤类型:
贴壁生长
- 供应商:
上海莼试
- 库存:
52
- 英文名:
PG13
- 生长状态:
详见说明书
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
免费包邮
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买人肝癌细胞;HB611说明书到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
| 产品名称 | PG13 逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞价格 |
| 类型 | 贴壁生长 |
| 编号 | CS-X4433 |
种属:PG13
提供形式:P4-5代T25细胞培养瓶
安全等级:2
模式菌株:未知
培养方法
培养基:90%DMEM+10%FBS
生长条件:95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度
生长特性:贴壁细胞
存储条件:50%DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项:
产品名称实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作;每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面;
操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作;无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作;
小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。操作过程中,应避免引起aerosol之产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。
SUMO-1/UBC9 泛素蛋白连接酶E2I抗体 规格 0.2ml
Anti-ITK/PSCTK2/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠IL-2诱导型T细胞激酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-CCL11/FITC 荧光素标记嗜粒细胞趋化蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-HER3/ErbB3/PE 荧光素PE标记HER3受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CDMP1/GDF5 软骨衍生形态发生蛋白1抗体 规格 0.2ml
SOD1(superoxide-dimutase-1) 超物歧化酶1抗原 0.5mg
ILVBL 英文名称: 酰乳合成酶蛋白抗体 0.2ml
PG13 逆转录病毒包被的TK-NIH3T3细胞价格 VAV1 鸟苷转换因子VAV1抗体 规格 0.2ml
Anti-eIF2 alpha/FITC 荧光素标记真核启动因子2α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Amylin/FITC 荧光素标记兔抗糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-FAM3B/PANDER /FITC 荧光素标记胰腺衍生因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Coronin 1a 肌动蛋白结合蛋白CORO1A抗体 规格 0.2ml
AGPA α1性糖蛋白1/类粘蛋白1 0.5mg
KAT13D 英文名称: 生物钟KAT13D蛋白抗体 0.2ml
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文献和实验RCR 实验,就是检测逆转录病毒的可复制性。刚开始由同事负责这个实验,结果一直问题不断,后来由我接手,从失败到成功,历时两个月,感触颇深!我们检测的是 GALV(gibbon ape leukemia virus)病毒的可复制性,根据现有 paper 中的做法,一是通过 qPCR 检测 GALV 病毒某段特定序列,二是 PG4 细胞空斑实验。1 qPCR 方法根据论文中的引物序列我们合成了引物,然后通过 SYBR 法来检测目的基因。一个很简单的 qPCR,看似一切都很正常,然而后续问题却接连
Gene Delivery to Cells in Culture Using Retroviruses
Moloney leukemia virus-based vectors can be generated in cells that express the products of three retroviral genes, gag, pol , and env . There are a number of cell lines such as PG13 (1 ) and FLYA13 (2 ), known as packaging cells
基因整合到染色体中稳定转染可用于难转染的细胞、原代细胞,体内细胞等逆转录病毒 特定宿主细胞但携带基因不能太大细胞需处分裂期需考虑安全因素腺病毒通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中瞬时转染特定宿主细胞可用于难转染的细胞需考虑安全因素阳离子脂质体法带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞稳定转染瞬时性转染所有细胞适用性广,转染效率高,重复性好,但转染时需除血清。转染效果随细胞类型变化大Biolistic颗粒传递法将DNA用显微重金属颗粒沉淀,再将包被好的颗粒用弹道装置投射入细胞,DNA在胞内
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