白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒直销

操作步骤 :
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
       引物1（10pM）               2μl
       引物2（10PM）              2μl
       Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
    视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品名称	白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒直销
英文名称	White Spot Syndrome Virus(WSSV)
货号	XGR7360

PCR在分子克隆和DNA分析中有多种用途，下面就向大家介绍PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	5   min	1
变性	94℃	10   sec	30-40
退火	50-65℃	20   sec	30-40
延伸	72℃	30   sec/kb	30-40
终延伸	72℃	5   min	1

白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒直销PCR实验步骤
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下是白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒直销的相关产品：
一水肌酸Creatine Monohydrate
其他中文名称：肌酸；N甲基胍基乙酸；胍基；肌肉素；肌氨基酸；甲胍基
英文名称：Creatine Monohydrate
其他英文名称：NAmidinosarcosine
产品：BR,99%
包装：100克/500克
CAS号：6020877
C4H11N3O3•H2O=149.15
级别：BR
含量：≥99.0%
重金属：≤5ppm
盐：≤0.03%
灰分：≤1ppm
灼烧残渣：≤0.10%
干燥失重：≤11.5%
肌：≤50ppm
二胺：≤20ppm
性状：晶体或结晶性粉末，在100℃时失水，303℃分解。微溶于水，不溶于，水中溶解度：13 G/L 水(20°C),1g/9L醇。熔点：292℃
用途：生化研究
保存：RT
5′胞苷酸，英文名或英文缩写：5′ CMP，级别：BR，99%，规格：KU
轻氧化铁 YqLLOW IRON OXIDq 037
3Chloro4(isopropylsulfonyl)thiopxene2 52022
9芴酮 9Fluorenone,≥99.0% 6259 25G 通用试剂
三四胺六乙酸/3,6,9,四羧甲基3,6,9,四氮杂十四烷二羧酸/TTHA 高，98% 1克 国产/进口
盐酸DL精酸，英文名或英文缩写：DLArginine HC1，级别：BR，99%，规格：1克
LAlanine 50g /100g/500g/1kg 国产
MES吗啉乙磺酸500克IND
蓝 VF ccid bluq 1 9
兔抗马IgG (HRP标记) AntiHorse IgGHRP antibody produced i... Null 0.2ML HRP酶标抗体
小鼠凝血因子Ⅴ(FⅤ)ELISA试剂盒 ，英文名： FⅤ ELISA Kit
小鼠环0酸鸟苷(cGMP)ELISA检测试剂盒MouseCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit 96T/48T
人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)免疫试剂盒 Human mast cell yptase,MCT ELISA Kit
Ratlowdensitylipoprotein,LDLELISAKit大鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
CYP1A2蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次
Mouseneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISA试剂盒小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
白斑综合症病毒探针法荧光定量PCR试剂盒直销兔子表皮生长因子(EGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 人血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)ELISA试剂盒
HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit 人内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanEsadiol,E2ELISA试剂盒人雌二醇(E2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
组织SPHK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit人孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒规格：96T/48T