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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
48
- 英文名:
详见说明书
- CAS号:
详见说明书
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
4°C保存
- 规格:
100T/盒
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
参数规格:
产品名称 has-mir-0000384 mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒
特异性:-
标记方式3’—尾段标记
保存条件:4°C保存一年
试剂盒内容:1.has-mir-0000384寡核苷酸探针杂交液 2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.胃蛋白酶(×10;Pepsin) 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
产品具有以下优点:
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
2、规范包被操作----吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
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5、技术服务要求:专业,规范,高效
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
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8、可检测指标齐全:炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
9、经济、实惠、可靠,完善、稳定的实验体系,优秀的科研队伍,先进的实验设备、准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴。
下列产品是公司正在热销的产品:
Anti-ALYREF Polyclonal Antibody英文名称: Anti-SATB1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C11H12N2O2性状:Powder纯度:99.0%
Anti-AMACR Polyclonal Antibody英文名称: Anti-KLHDC2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H24N2O性状:Powder纯度:98.0%
Anti-AMACR/P504S Monoclonal Antibody英文名称: Anti-MCM10 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H24N2O2性状:Powder纯度:96.5%
Anti-AMBP Polyclonal Antibody英文名称: Anti-RGS14 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H20NO4性状:Yellow powder纯度:99.0%
Anti-AMBRA1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-FAM49B Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C21H22NO4性状:Yellow powder纯度:99.0%
Anti-AMBRA1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-ANG Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H14NO4性状:Orange needles纯度:98.5%
Anti-AMD1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-H1F0 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H16N2O4性状:Yellow powder纯度:97.5%
Anti-AMDHD2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-ASPSCR1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C24H30N2O5性状:Powder纯度:97.5%
Anti-AMHR2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-ADAMTS7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H37NO6性状:Powder纯度:95.0%
Anti-AMHR2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名称: Anti-MDK Polyclonal Antibody分子式:C21H24N2O4性状:Powder纯度:%
Anti-AMIGO2 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-Claudin 8 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C11H10N2O2性状:Powder纯度:99.0%
Anti-AMPD1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-MTRF1L Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C14H8N2O2性状:Yellow powder纯度:98.0%
Anti-AMPD1 Polyclonal Antibody英文名称: Anti-TRIM8 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C10H14N2O5性状:Powder纯度:98.5%
Anti-AMPH Polyclonal Antibody英文名称: Anti-HMGB1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C14H14N2O性状:Powder纯度:%
Anti-AMPH Polyclonal Antibody英文名称: Anti-Phospho-H2AFX-S139 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C13H12N2O性状:Powder纯度:98.5%
Anti-AMPKa1 Monoclonal Antibody英文名称: Anti-PGC Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C14H12N2O2性状:Powder纯度:98.5%
Anti-AMT Polyclonal Antibody英文名称: Anti-CBX3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C22H26N2O4性状:Powder纯度:97.5%
Anti-AMY1A Polyclonal Antibody英文名称: Anti-Cyclin B1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C21H22N2O4性状:Powder纯度:97.0%
Anti-AMY2A Polyclonal Antibody英文名称: Anti-MOCS3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C11H10N2O性状:Powder纯度:99.0%
Anti-AMY2A Polyclonal Antibody英文名称: Anti-BAG2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C17H9NO3性状:Yellow powder纯度:96.0%
has-mir-0000384 mRNA原位杂交试剂盒Ifflaiamine特异性: 人、大鼠、小鼠Caspase-8 mRNA原位杂交试剂盒
Lauterine特异性: 人、大鼠、小鼠Caspase-7 mRNA原位杂交试剂盒
(Z)-1-Methyl-2-(undec-6-enyl)quinolin-4(1H)-one特异性: 人、大鼠、小鼠Caspase-8 mRNA原位杂交试剂盒
Indole-3-glyoxylamide特异性: 人、大鼠、小鼠Catenin γ mRNA原位杂交试剂盒
Cephalotaxine hydrochloride特异性: 人、大鼠、小鼠Cathepsin E mRNA原位杂交试剂盒
Evocarpine特异性: 人、大鼠、小鼠Catenin α mRNA原位杂交试剂盒
Fortuneine特异性: 人、大鼠、小鼠、兔Catenin β mRNA原位杂交试剂盒
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文献和实验happy0coral 哪位大侠能告诉我用pre-miR转染是属于瞬时还是稳定转染啊,另外是不是只要是转染就叫miRi啊 sxj_fish 很多基因都是可以转染的 ,DNA也可以转染,还有SIRNA也是可以转染的 芍药香 可以选用瞬时转染也可以选用稳定转染,不过现在microRNA的前体转染大多是瞬时的。 转染只是实验方法,应用于多种核酸的转入。
myskite u6序列很多,用哪个都可以吗? detector350 在做microRNA相对定量检测时候,一般选用U6或者5s。 myskite 我想自己设计u6的反转引物,嗯,有设计好的吗? detector350 他们那边有的,你可以发邮件询问下 kiss9499 没有,直接买的试剂盒
qisanni05 请教各位大侠,为什么我在MiRbase上找不到hsa-mir-150 基因上下游序列呢,请各位高手帮忙找一下,十分感谢! qisanni05 这是什么意思啊,由于刚涉及这方面还不太懂,还请高手多指教,非常感谢! lide658 你是要找编码hsa-mir-150的序列吗? 如果是想构建hsa-mir-150表达载体,在MiRbase上是找不到的,你只能
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