15毫升离心管

高通量破碎组织提取核酸或蛋白质

敏感的物质时，低温状态的控制显得尤为关键。 以下破碎方法结合了仪器的使用，使高通量或低温破碎样品、提取内容物更便捷。文章最后分享了提取核酸和蛋白质的实验效果图。 注：由于样品的具体差异及实验要求的不同，下文数据部分请咨询厂家。 第一部分 破碎动物组织 1）样品：猪肌肉组织 2）仪器： Tissuelyser 多样品组织研磨机（品牌：上海净信）； 耗材：***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠 3）步骤： a. 取***克

操作篇：Western Blot 蛋白样品制备

分装转移倒 0.5 min 的离心管中放于-20℃ 保存。 （个人感觉上述方法可操作性有待加强，细胞中蛋白本来就很少，一瓶 50 ml 的细胞有时按照实验要求只能加 100-200μ 的裂解液，按照上述操作，直接用 200μ 裂解液进行裂解，根本就不够瓶壁上沾的。本人是先用预冷的 PBS（一般数毫升）加入后，用细胞刮刮下细胞，转移至试管中，如果数瓶细胞是收集同一蛋白的，可以放在同一试管，离心后再将蛋白转移到 EP 管中，这样可操作性就比较强） 二、组织中总蛋白的提取：

人外周血PBMC的制备及注意事项

人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血，用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释，上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中，先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液（1.077 g/mL），再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液，血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注：Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温，温度过高会导致分离不明显，温度过低会导致密度过大，同样分离效果不好， 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移