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- 美国
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- 2025年10月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
在零下15度以下保存, 避免光照
- 保质期：
2年
- 英文名：
Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3*
- 库存：
3
- 供应商：
AAT Bioquest
- CAS号：
273221-67-3
钙离子荧光探针Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3*
适用范围
用于钙离子检测
产品优势
1.低背景荧光：Fluo-4与Ca²⁺结合后会显著增强荧光信号，因此能有效降低背景干扰，提高检测灵敏度。
2.适用范围广：活细胞Ca²⁺成像、流式细胞术、药物筛选、GPCR功能研究等。
3.单波长检测：荧光强度随Ca²⁺浓度升高而增强
工作原理
穿透细胞膜: 将 Fluo-4 AM 溶解在 DMSO 等有机溶剂中，然后与细胞共同孵育。疏水性的 Fluo-4 AM 分子会穿过细胞膜进入细胞质。
酶解活化: 进入细胞后，细胞质内的内源性酯酶会水解掉 AM 酯基团。
探针活化与滞留: 水解后，探针恢复为带负电的、水溶性的 Fluo-4 形式（类似于五钾盐，但留在细胞内）。这种带电形式无法再穿过细胞膜，因此被“滞留”在细胞质内。
检测钙信号: 活化的 Fluo-4 与细胞质内的钙离子结合，在 488 nm 激光激发下发出强烈的绿色。
使用方法
Fluo-4 AM 的分子量为 1096.95 道尔顿。其钙结合亲和力为 345 nM。可通过将 Fluo-4 AM 溶解在 DMSO 中（2 至 5 mM）来制备储备溶液。为将其加载到细胞中，需用缓冲液（例如含有 0.04% Pluronic® F-127 的 HHBS）稀释储备液，制备成浓度为 2 至 20 µM 的工作液。
注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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文献和实验【求助】哪位高手能够告诉我用荧光染色剂fluo-3/AM测量细胞内钙离子浓度应注意什么
g_qhzhang 哪位大侠能够告诉我用荧光染色剂fluo-3/AM测量细胞内钙离子浓度应注意什么？谢过了先 g_qhzhang 之前看到园子里有战友讨论荧光染色剂fura-2觉得非常好，对这方面了解很少，被热心战友推荐用fluo-3/AM，不知两个有何区别，只知是2代和3代，希望得到各位大侠指点。 婷子 fura2 做流式细胞仪检测 fluo3AM 做激光共聚焦好点，但网上看到
作用。在哺乳动物的神经系统中，钙离子是一类重要的神经元胞内信号分子，神经元静息状态下，胞内钙离子浓度约为50-100nM，而当神经元活动的时候，胞内钙离子浓度能上升10-100倍，而钙离子对于突触囊泡释放必不可少；神经元在放电的时候会爆发出一个短暂的钙离子浓度高峰，这意味着神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动。神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动示意图因而，神经元钙离子成像技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系，利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针（钙离子指示
Fluo-3-Am为一新型的高度特异性Ca2+荧光指示剂，可以灵敏地反映细胞内游离钙离子浓度的变化，Fluo-3-Am进入细胞后经非特异性酯酶脱去Am酯，成为脂溶的Fluo-3留在细胞内，当Fluo-3与细胞内游离钙结合后，其荧光强度是Fluo-3本身的40倍以上，当用480nm波长激发时，其荧光强度与游离钙离子浓度成正比。具体如下：1、钙荧光探针负载；取细胞悬液，加Fluo-3-Am至10μmol/L，置二氧化碳培养箱中孵育1h，其间轻微振荡3次。离心，去掉多余的染料。再用无钙缓冲液反复洗涤
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